李 欣 李 芳 王 媛 张宝玉 张丽洁

    1.首都医科大学附属北京潞河医院内分泌代谢与免疫性疾病中心，北京 101149；2.山西医科大学第二医院风湿免疫科，山西太原 030001

    类风湿关节炎(RA)具有较高的致残率，目前尚无有效方法逆转或修复软骨与骨的破坏。破骨细胞在维持骨吸收和骨形成的过程中起着重要的作用[1]。NF-κB 受体活化因子配体(RANKL)是调节破骨细胞生成的关键因子，其介导的NF-κB 信号通路对诱导破骨细胞生成、活化，抑制破骨细胞凋亡有着重要的作用[2-3]。研究发现，RANKL 介导的NF-κB 信号通路的激活与肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)、c-fos、活化T 细胞核因子1(NFATc1)等物质有关[4-5]。苦参碱具有免疫抑制作用[6]，其可能与NF-κB 信号通路有关。本研究将通过体外实验，探索苦参碱对RANKL 诱导破骨细胞分化及c-fos、TRAF6、NFATc1 表达的影响。

    1 材料与方法

    1.1 细胞培养

    RAW264.7 细胞(湖南丰晖生物科技有限公司，CL0266)培养于含10%胎牛血清、100 U/mL 青霉素、100 U/mL 链霉素的DMEM 培养基(北京索莱宝生物技术有限公司，12100)中，在恒温培养箱中以5% CO2、37℃及饱和湿度条件下培养。

    1.2 分组

    根据加入破骨细胞诱导剂RANKL(北京索莱宝生物技术有限公司，P00226-50 μg)及不同剂量苦参碱(北京索莱宝生物技术有限公司，SM8130-20 mg)分为五组，即空白组(A 组)、诱导组(B 组)、苦参碱低剂量组(0.5 mg/mL，C 组)、苦参碱中剂量组(1 mg/mL ......