王 佳 叶冬梅 袁小林

    大连大学附属中山医院中心实验室，辽宁大连 116001

    多核巨细胞(multinucleated giant cells，MGC)是与肉芽肿相关的同型巨噬细胞合胞体[1]，其种类繁多，如破骨细胞、朗汉斯巨细胞、异物巨细胞等。其中破骨细胞的研究最多，为MGC 融合机制提供了更深入研究[2-3]。MGC 的形成始于单核前体细胞，通过促融合细胞因子获得融合能力，扩展富含肌动蛋白的丝状投射，细胞相互迁移，并通过丝状突起或融合足发生黏附。在相应位置，融合剂使质膜靠近，去除中间膜实现细胞质共享形成MGC，但其作用及生理功能尚不清楚[4]。本课题组在研究中观察到巨噬细胞与其他细胞系体外共培养，当细胞受到损伤或发生坏死时或有巨大细胞及典型MGC 出现。本研究对细胞损伤微环境中MGC 的形成进行动态观察，为MGC 的形成机制及其功能的研究提供实验资料。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    小鼠RAW 264.7 巨噬细胞购自中科院；HL-1 小鼠心房肌细胞购自武汉菲恩生物科技有限公司。

    1.2 试剂与仪器

    RPMI-1640 培养基(天津灏洋华科生物科技有限公司，HY1640)；DMEM/HIGH GLUCOSE 培养基(沃卡威生物技术有限公司，SH30022.01)；优级胎牛血清(天津灏洋华科生物科技有限公司，11011-8611)；青链霉素混合液(Hyclone，S110JV)；0.25%乙二胺四乙酸(ethylene diaminetetraacetic acid，EDTA)胰蛋白酶(Hyclone，KGY0012)；Type 120c 普通光学显微镜(尼康仪器有限公司)；Nikon-ECLIPSE-Ti 活细胞工作站(上海衡浩仪器有限公司)；DiO 荧光染料(北京博奥森生物技术有限公司，D-9102)；Hoechst 33342 荧光染料(北京博奥森生物技术有限公司 ......