T3 对甲状腺乳头状癌细胞TPC-1 增殖的影响及机制研究
货号,孔板,克隆,1材料与方法,2TPC-1细胞培养和转染,3实时无标记细胞功能分析技术(real-timeunlabeledcellfunctionanalysistechnique,RTCA)和克
程雅楠 王 岩 孙荣欣 郎佳楠 曹 斌 杨龙艳 赵 冬首都医科大学附属北京潞河医院内分泌代谢与免疫性疾病中心,北京 101149
甲状腺癌是世界范围内和我国最常见的内分泌系统恶性肿瘤[1]。甲状腺乳头状癌(papillary carcinoma of thyroid,PTC)更是占我国甲状腺癌的99%以上[2]。其特点是易转移,且复发率高达25%[3-4]。三碘甲腺原氨 酸(triiodothyronine,T3)作为甲状腺激素(thyroid hormone,TH)的主要活性成分,能通过与TH 核受体形成复合物介导自身的生物活性,发挥重要的生理功能[5-6]。近年来研究发现,T3能促进人前列腺癌[7]、肺癌[8]、乳腺癌[9]细胞的增殖,增加肿瘤治疗难度。然而目前,T3对PTC 细胞增殖的影响及其确切机制仍不清楚。有研究发现,TH 受体可以调节PDZK1 的表达[10]。PDZK1 能通过受体蛋白调控肿瘤细胞的增殖[11]。因此本课题组推测T3可能通过调节PDZK1 表达而调控PTC 细胞的增殖,本研究将对此科学问题进行探讨论证,并期望为PTC 的防治提供新思路。
1 材料与方法
1.1 材料
人甲状腺乳头状癌细胞系TPC-1 购自国家生物医学实验细胞资源库;RPMI-1640 培养基购自Gibco(货号:C11875500BT);胎牛血清购自Excell Bio(货号:FND500);活性炭处理过的胎牛血清购自HyClone(货号:SH30068.03);辣根酶标记的羊抗鼠免疫球蛋白(货号:ZB-2305)、辣根酶标记的羊抗兔免疫球蛋白(货号:ZB-2301)和anti-GAPDH 抗体(货号:TA-08)均购自北京中杉金桥生物技术有限公司;anti-PDZK1 抗体(货号:ab121248)购自Abcam;PDZK1 过表达慢病毒(滴度:2×108TU/ml,货号:30038-J1)、阴性对照慢病毒(滴度:2×108TU/ml,货号:CON335)和HitransG P(25×感染增强液 ......
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