miR-30a 在胃肠道间质瘤中的表达及其调控细胞增殖、侵袭和凋亡的机制
萤光,增殖率,试剂盒,1资料与方法,1一般资料,2细胞株,3药物,主要试剂,仪器,4qRT-PCR法检测GIST组织及正常组织中miR-30a表达量,5细胞培养,转染及分组,6qRT-P
任 华 马 明 王 超 王昭君1.山西省大同市第五人民医院普外科,山西大同 037000;2.山西医科大学生理学系,山西晋中 030600
胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumor,GIST)是最普遍的肉瘤类型,约占全部胃肠道肿瘤的0.2%,多发于50 岁以上人群[1]。资料显示,GIST 的发生率在不同地区和人群中有所差异,以中国、韩国及挪威发病率最高[2-3]。GIST 可并发呕吐、消化道出血等症,严重时可诱发消化道梗阻及穿孔,导致严重腹部疼痛及感染,危及生命健康。现阶段,GIST 治疗方式主要包括手术切除和靶向药物治疗,其中伊马替尼是目前不可切除性原发性及转移复发性GIST 的一线治疗药物,但并非所有患者均对其敏感,且部分患者存在耐药问题,导致预后不甚理想[4-5]。寻找新的治疗策略是目前GIST 领域的重要课题。微RNA-30(microRNA-30,miR-30)a 是广泛表达于人体各种组织中的一种miRNA,在多种肿瘤中发挥抑制或促进的作用[6-8]。miR-30 家族中的其他成员也在GIST 中发挥着重要的调节作用,如miR-30c 可以通过靶向基因来抑制GIST 细胞的增殖和迁移,表明miR-30 家族是在GIST 发展和治疗中具有潜在价值的生物标志物和药物靶点[9]。然而,目前关于其在GIST 中的作用及相关机制报道尚少。研究miR-30a 在GIST 中的作用和机制,有助于揭示GIST 的发病机制,寻找新的治疗靶点和策略。本研究采用脂质体转染法转染miR-30a 基因过表达质粒、沉默质粒至GIST-T1 细胞中,检测细胞行为学变化,并分析可能机制。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2021 年11 月至2022 年11 月在山西省大同市第五人民医院进行手术切除治疗的GIST 患者30 例,男19 例,女11 例;年龄51~72 岁,平均(65.61±9.53)岁。所选受试者均通过病理学检查证实为GIST,排除术前放化疗或药物治疗者。选取患者手术切除的正常组织(距离GIST 组织边缘>5 cm)作为对照,经手术切除的GIST 组织、正常组织均投入液氮保存。本研究经山西省大同市第五人民医院伦理委员会批准(2021-030),患者或家属对研究内容知情同意。
1.2 细胞株
人GIST-T1 细胞株购自美国Sigma-Aldrich 公司。
1.3 药物、主要试剂、仪器 ......
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