包利利 赵 达 俞 岩 周俏苗▲

    1.海南医学院第一临床学院，海南海口 570216；2.海南省妇女儿童医学中心妇科，海南海口 570100

    宫颈癌是女性癌症中第四大常见的癌症[1-2]。尽管手术及放化疗方法在过去几十年里逐渐被应用于宫颈癌的治疗，但其5 年预后情况仍较差[3]。因此，深入开展宫颈癌机制探讨对改善宫颈癌患者的预后及新疗法的开发具有重要意义。长链非编码RNA(long non-coding RNA，lncRNA)具有染色质修饰、转录、剪接和表观遗传调控等多种生物学功能[4-7]。多项研究表明，lncRNA 可以调节DNA 甲基化、组蛋白修饰、染色质重塑，并作为微RNA(microRNA，miRNA)的前体调控肿瘤的发生[8-9]。近期研究表明，lncRNA 通过内源性竞争RNA(competing endogenous RNA，ceRNA)机制调控miRNA 对靶基因的抑制作用，参与癌症调控过程[10]。lncRNA PTENP1(以下简称“PTENP1”)是肿瘤抑制因子PTEN 基因的“假基因”，在许多恶性肿瘤中通过调节PTEN 基因的表达发挥其抑制肿瘤的功能，但其在宫颈癌中的作用尚不清楚[11-14]。因此本研究旨在探讨PTENP1 在宫颈癌进程中的作用及其机制，为宫颈癌的早期筛查及靶向治疗提供依据。

    1 对象与方法

    1.1 研究对象

    本研究选取54 例2019 年1 月至2022 年12 月在海南省妇女儿童医学中心确诊的宫颈癌患者，收集其癌组织和癌旁组织(与肿瘤组织距离≥5 cm)。患者年龄(45.34±12.73)岁，肿瘤分期Ⅰ～Ⅱ期27 例，Ⅲ～Ⅳ期27 例。纳入标准：①经病理诊断为宫颈癌；②资料完整。排除标准：①远处转移；②合并其他恶性肿瘤；③妊娠期或哺乳期；④手术前经过放化疗处理。本研究经过海南省妇女儿童医学中心医学伦理学委员会批准(HNWCMC 伦审2022 年第[136]号)。

    1.2 细胞系选择与培养

    宫颈癌细胞系(HeLa、SiHa、C33A、Caski)、正常宫颈上皮细胞H8 及293T 细胞均购自中国科学院上海生命科学研究院。所有细胞置于含有10% FBS 的DMEM 培养基(美国Gibco 公司)中，于37 ℃和5%的CO2条件下培养。

    1.3 细胞分组和相应的处理

    选取合适的宫颈癌细胞系进行下一步实验，将处于对数生长期的细胞分为以下七组：空白组(无处理)、pcDNA3.1 组(转染pcDNA3.1)、pcDNA3.1-PTENP1组(转染pcDNA3.1-PTENP1)、NC 组(阴性对照 ......