比较顺铂不同给药方式对腹膜移植瘤的影响(2)
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1.3 建立黑色素瘤移植鼠模型 制备黑色素瘤细胞悬液 [2]。预实验取C57BL雌性纯系小鼠30只，每只小鼠腹腔内注射黑色素瘤细胞8×105个(0.2 ml)，注射后24 h开始处死鼠，剖腹探查腹膜、大网膜、肠系膜，观察有无瘤结节形成。每24 h处死3只，待肉眼可见瘤结节形成后，停止处死鼠。余下的鼠留下观察生存时间。同法制备荷瘤鼠72只予正式实验。
1.4 移植瘤给药实验 于C57BL小鼠接种B16细胞后72 h，取荷瘤鼠72只，随机分为3组，每组24只。1组为对照组，于小鼠腹膜形成瘤结节后，腹腔注射生理盐水0.2 ml；2组为大剂量顺铂组，腹腔注射cDDP 12 mg/kg；3组为连续小剂量顺铂组，cDDP每天用量为4㎎/㎏，连续腹腔注射3 d。每组分别于用药后1、2、3、6 d处死鼠，每组每次处死鼠6只，计数腹膜(包括胃大小网膜、肠系膜、腹壁)瘤结节数，2、3组同时剪取鼠大网膜并取外周血，大网膜在40℃保存，血在4℃保存，留待测定其内含铂量。
1.5 测定组织及外周血的含铂量 采用原子光谱吸收仪测定含铂量[3]。分析条件：波长265.9 nm、灯电流12.5 mA、狭缝0.4 nm、石墨炉为管型(全热解)、载气流量200 ml/min、进样量10 μl。测定条件：测定方式为峰高法、扣背景方式为塞曼(ZAA)。组织处理方法采用硝酸高氯酸湿法分解方式，外周血可直接测定。
1.6 统计学方法 采用SPSS10.0统计软件，行独立样本t检验。
2 结果
2.1 瘤细胞在小鼠腹腔内的种植情况 小鼠腹腔内种植8×105个黑色素瘤细胞后48 h均可见肉眼结节形成，瘤结节为黑色，主要见于大网膜、肠系膜、腹壁。预实验未处死的荷瘤鼠2周时均存活良好。
2.2 移植瘤给药实验结果 与对照组相比，腹腔内注射cDDP后第1、2、3、6天时，小鼠腹膜瘤结节数均明显减少。且在第3、6天时，连续小剂量顺铂组的小鼠腹膜瘤结节数明显少于大剂量顺铂组，见表1。
2.3 大网膜组织及外周血含铂量结果 在腹腔内注射cDDP后第6天时，连续小剂量顺铂组的小鼠大网膜中含铂量明显高于大剂量顺铂组，且具有统计学意义(r=0.9973)，见表2。在腹腔内注射cDDP后第3、6天时，连续小剂量顺铂组的小鼠外周血含铂量明显低于大剂量顺铂组 ......
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