多药耐药基因-腺病毒重组表达载体的构建及鉴定(2)

http://www.100md.com 2008年2月24日 刘玉侠　陈军　于　鸿

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     2 结果

    2.1 MDR1体外扩增结果 见图1、2。PHA MDR质粒全长为15 192 bp(见图1)。经XhoI和SacII双酶切后，出现2条泳带，一条为PHA质粒，大约为11 kb；另一条为MDR1，大约为4.7 kb。从电泳结果可以看出，此2条电泳条带位置正好与此符合(见图2)。

    1.DNA Marker 2.3.4PHAMDR质粒

    图1 PHAMDR质粒1.DNA Marker 2.双酶切PHA MDR

    图2 双酶切PHAMDR质粒

    2.2 MDR1-腺病毒重组载体转染脐血有核细胞的鉴定 转染MDR1的脐血有核细胞进行DNA提取后，用MDR1全长及特异引物进行PCR扩增，并分别用0.8%和1.5%的琼脂糖进行凝胶电泳，结果见图3、4。MDR1全长大约4.5 kb，从图3可以看出，此位置上可见一泳带；设计的MDR1特异片段为157 bp，从图4可见在此附近有一条泳带，证明MDR1基因已转染入脐血有核细胞。

    3 讨论

    肿瘤细胞耐药类型分为：原发性耐药、继发性耐药和多药耐药。人类 MDR 基因家族包括 MDR1 和MDR2 ......

    http://www.100md.com/html/paper/1673-7555/2007/26/08-1.htm

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