【摘要】目的通过基因工程的方法克隆人神经营养素-3成熟蛋白(hNT-3)的基因，并在大肠杆菌中进行表达，为研究hNT-3的生物学作用提供材料。方法以人胎脑cDNA为模板，采用PCR方法扩增hNT-3基因，并将其克隆在pGEM-T载体上，将经过序列分析确定的hNT-3基因插入原核表达载体pGEX-6p-1中，构建了重组表达载体pGEX-6p-1-NT-3，用SDS-PAGE法测定其在大肠杆菌中的表达。结果经序列测定分析，所克隆DNA片断与文献发表序列(GenBank, MW002527)同源性为99.7%，并获得了高效表达hNT-3蛋白的重组菌株。结论体外成功扩增hNT-3基因，并在原核细胞中高效表达。

    【关键词】神经营养素-3；PCR；基因克隆；原核表达

    神经营养因子(neurotrophic factor，NTF)是机体产生的能够促进神经细胞存活、生长、分化的一类蛋白质。神经营养素家族(neurotrophin family， NTs)是“经典的”神经营养因子，包括神经生长因子(nerve growth factor，NGF)、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor，BDNF)、神经营养素-3(neurotrophin-3 ......