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编号:11526682
不同引物标记物在显色法芯片检测结核分支杆菌利福平和异烟肼耐药基因中应用比较
http://www.100md.com 2008年2月24日 郭乃洲 王万相 严爱华 马 达 周步全 马 力 景奉香
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    郭乃洲 王万相 严爱华 马达 周步全 马力 景奉香

    【摘要】目的比较不同标记物在显色法芯片检测结核分支杆菌利福平和异烟肼耐药基因中的影响。方法分别采用地高辛、荧光素和生物素标记引物,建立地高辛-抗地高辛、荧光素-抗荧光素和生物素-亲和素酶呈色法芯片检测结核分支杆菌利福平(RFP)和异烟肼(INH)耐药基因方法,同时用3种方法检测46株结核分支杆菌临床分离株、19种非结核分支杆菌标准株、9种非分支杆菌标准株和结核分支杆菌H37Rv标准株,并对3种方法的敏感性和重复性进行比较。结果经3种方法平行检测,46例结核分支杆菌临床分离株结果完全一致;19种非结核分支杆菌标准株、9种非分支杆菌标准株结果均为阴性,结核分支杆菌H37Rv标准株结果均为野生型;地高辛系统和荧光素系统敏感度为2.0×103拷贝/ml,生物素-亲和素系统敏感度为2.0×104拷贝/ml;3种方法均有良好的重复性。结论3种方法均具有良好的重复性和特异性,生物素系统敏感度略低于地高辛系统和荧光素系统。

    【关键词】 地高辛 荧光素 生物素 显色法 芯片 结核分支杆菌 利福平 异烟肼 耐药基因

    【基金】江苏省盐城市科委立项课题(项目批号YK2005105)

    【分类号】R450

    DNA芯片技术是近几年来发展起来的进行大规模遗传多态性检测的新方法,是物理学、微电子学与生命科学等学科的交叉结合,因其灵敏度高、通量大而被广泛应用于各种基因多态性及点突变的检测。我们采用地高辛、荧光素和生物素分别标记引物建立地高辛-抗地高辛、荧光素-抗荧光素和
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     摘要:目的比较不同标记物在显色法芯片检测结核分支杆菌利福平和异烟肼耐药基因中的影响。方法分别采用地高辛、荧光素和生物素标记引物,建立地高辛一抗地高辛、荧光素一抗荧光素和生物素一亲和素酶呈色法芯片检测结核分支杆菌利福乎(RFP)和异烟肼(INH)耐药基因方法,同时用3种方法检测46株结核分支杆菌临床分离株、19种非结核分支杆菌标准株、9种非分支杆菌标准株和结核分支杆菌1-137Rv标准株,并对3种方法的敏感性和重复性进行比较。结果经3种方法平行检测,46例结核分支杆菌临床分离株结果完全一致;19种非结核分支杆菌标准株、9种非分支杆菌标准株结果均为阴性,结核分支杆菌H37Rv标准株结果均为野生型;地高辛系统和荧光素系统敏感度为2.0×103拷贝/ml,生物素一亲和素系统敏感度为2.0×104拷贝/ml;3种方法均有良好的重复性。结论3种方法均具有良好的重复性和特异性,生物素系统敏感度略低于地高辛系统和荧光素系统。

    关键词:地高辛;荧光素;生物素;显色法;芯片;结核分支杆菌;利福平;异烟肼;耐药基因

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