肝细胞的体外培养及乙醛对肝细胞的形态影响
酒精性肝病,细胞培养,线粒体跨膜电位,钙离子
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王晓英 阎明 山东大学齐鲁医院 山东大学齐鲁医院
【摘要】目的通过将肝实质细胞分离、纯化、体外培养,全面分析原代肝细胞的生长状态,研究乙醛诱发大鼠肝细胞毒性和胞内游离Ca2+变化及Ca2+螯合剂的干预效应,探讨乙醛致肝细胞损伤机制及Ca2+螯合剂的保护作用。方法分离培养大鼠原代肝细胞,以含300mmol/L乙醛的培养基培养肝细胞24、48h,相差倒置显微镜下观察肝细胞的形态变化。结果相差倒置显微镜下,新分离的大鼠肝细胞折光性强,有立体感,乙醛处理肝细胞24h后肝细胞体积肿胀,颜色变深,颗粒粗糙,部分细胞脱壁,少量细胞出现细胞壁缺失,呈放星状;乙醛处理48h后,可见到肝细胞质变稀疏,细胞核固缩,表面出现胞膜疱,细胞膜破碎;相当一部分细胞破碎脱落可见到一些核已消失的肝细胞浆或残屑。结论①乙醇可导致严重的肝细胞极性紊乱,导致细胞损伤,形成不同程度的病理状态,从而在细胞及分子水平对导致肝病形成的机理进行了探讨;②乙醛诱发肝细胞毒性和损伤可能与肝细胞[Ca2+]i升高有关。
【关键词】 酒精性肝病 细胞培养 线粒体跨膜电位 钙离子
【分类号】R575
肝脏作为体内乙醇代谢的主要脏器,在整个物质代谢过程中具有广泛而重要的功能。目前在体内研究肝细胞代谢乙醇、药物或其他化学物质的分子机制有一定的困难,因此我们建立体外原代肝细胞培养模型应用于肝细胞分子生物学的研究,作为对体内肝脏研究模型的有益补充。乙醇滥用与乙
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[摘要]目的:通过将肝实质细胞分离、纯化、体外培养,全面分析原代肝细胞的生长状态,研究乙醛诱发大鼠肝细胞毒性和胞内游离Ca2+变化及Ca2+螯合剂的干预效应,探讨乙醛致肝细胞损伤机制及Ca2+螯合剂的保护作用。方法:分离培养大鼠原代肝细胞,以含300mmoL/L乙醛的培养基培养肝细胞24、48h,相差倒置显微镜下观察肝细胞的形态变化。结果:相差倒置显微镜下,新分离的大鼠肝细胞折光性强,有立体感,乙醛处理肝细胞24h后肝细胞体积肿胀,颜色变深,颗粒粗糙,部分细胞脱壁,少量细胞出现细胞壁缺失,呈放星状;乙醛处理48h后,可见到肝细胞质变稀疏,细胞核固缩,表面出现胞膜疱,细胞膜破碎;相当一部分细胞破碎脱落可见到一些核已消失的肝细胞浆或残屑。结论:①乙醇可导致严重的肝细胞极性紊乱,导致细胞损伤,形成不同程度的病理状态,从而在细胞及分子水平对导致肝病形成的机理进行了探讨;②乙醛诱发肝细胞毒性和损伤可能与肝细胞[Ca2+]i升高有关。
[关键词]酒精性肝病;细胞培养;线粒体跨膜电位;钙离子
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