番茄红素联合α-生育酚过氧化氢诱导晶状体混浊的实验研究(2)
1.2 主要仪器与试剂 苏州YZ20PS眼科手术显微镜及眼科器械,美国NV2500E型二氧化碳细胞培养箱,德国BP-211G型电子天平,上海UV-754型紫外分光光度计,美国BD公司FACScan流式细胞仪,苏州安泰空气技术有限公司BHC-1300IIA/B3超净工作台。RPMI1640培养液(美国Gibco公司),番茄红素(LY)(华北制药有限公司批号041202 纯度90%),使用时用无水乙醇稀释成不同浓度的应用液,1 mol/lα-生育酚(北京硕康医药有限公司批号050401 纯度99%)使用时用无水乙醇稀释。总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)及过氧化氢酶(CAT)测定试剂盒均购自南京建成生物工程研究所1.3 离体培养大鼠晶状体 过量乙醚麻醉致死后眼部碘伏消毒,无菌状态下取出眼球,用含500 μ/ml的青霉素生理盐水冲洗眼球后置于含青霉素80万U,庆大霉素8万U的生理盐水500 ml中,1 min后取出,在手术显微镜下由后极部剪开巩膜,小心摘出晶状体,生理盐水冲洗后放入24孔细胞培养板,每孔加入含青霉素100 U/ml,链霉素100 μg/ml及含10%胎牛血清的1 640培养液2 ml。置入37℃,5%CO2培养箱内培养6 h,取透明晶状体备用 ......
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