葡激酶在毕赤酵母中的表达及纯化(1)
【摘要】 目的 探索葡激酶基因在毕赤酵母中的表达和纯化方法。方法 根据毕赤酵母的偏性合成了葡激酶基因，克隆到分泌型酵母表达载体pPIC9K中，重组载体线性化后，转化毕赤酵母GS115，甲醇诱导表达。应用 DEAE-Sepharose FF、Q-Sepharose FF和Sephacry1 S-200凝胶过滤层析法纯化表达产物，采用溶圈法对纯化产物进行生物学活性测定。结果 葡激酶在毕赤酵母中GS115的表达量约站总蛋白的45%；表达产物经DEAE-Sepharose FF、Q-Sepharose FF和SephacrylS-200纯化后纯度达到95%；测得其比活为5.2×104AU/mg。结论 利用毕赤酵母成功进行了重组葡激酶基因的表达及其表达产物的纯化。【关键词】葡激酶；毕赤酵母；表达和纯化
Expression and purification of staphylokinase in Pichia pastoris
SONG Lei，LIU Hong-jun ......
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