高危型人乳头瘤病毒感染与肺癌的关系(2)
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 标本收集 选取2007年7月至2008年3月在河南第一荣康医院、安阳市第一人民医院、新乡医学院第三附属医院住院并经手术切除的肺癌患者的新鲜标本63例,年龄46~67岁,平均(56.7±3.3)岁。组织离体后分为两部分,一部分用于提取基因组DNA,另一部分用10%甲醛固定后备做病理检验。所有患者术前均未经放疗或化疗。
1.1.2 主要试剂 100 bp DNA Markers为美国Invitrogen公司产品。dNTPs、Taq DNA聚合酶、DNA提取试剂盒(Wizard SV Genomic DNA Purification System)等为美国Promega 公司产品。RNA酶A、蛋白酶K、琼脂糖等为德国Merk公司产品。
1.1.3 PCR引物 所有PCR引物均由上海生物工程公司合成。引物序列及目的片断长度见表1。
1.2 方法
1.2.1 肺癌组织的病理检验 常规10%甲醛固定、石蜡包埋并切片后,进行苏木素-伊红(Hematoxylin-Eosin,HE)染色,光学显微镜观察,以确定病变性质。
1.2.2 基因组DNA的提取 按Promega 公司试剂盒说明书进行 ......
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