坐骨神经慢性压迫损伤性疼痛与脊髓背角P物质关系研究(2)
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1.4.3 热痛阈的测定 采用ZH-LUO/B辐射光热测痛仪(正华公司,中国)测定大鼠足底热痛阈。设定辐射热强度：49 I.R；实际照度：180 mW。记录辐射照射开始到抬足的时间，该时间即为热痛阈。单次光照射时间不超过30 s，间隔5 min，术侧与健侧各测定5次，取平均值。
1.5 脊髓背角SP的免疫组织化学测定及分析
①石蜡冠状切片，脱蜡入水，3%H2O2室温孵育10 min，蒸馏水洗3 min×3次；
②微波炉(中档)修复3 min，室温冷却60 min，蒸馏水洗3 min×3次，0.01 mol/L,pH 7.4 PBS漂洗3 min×3次 ；
③滴加 3%H2O2 水溶液，室温15 min，蒸馏水洗3 min×3次，0.01 mol/L,pH 7.4 PBS 漂洗3 min×3次 ；
④滴加30 μl正常羊血清，室温孵育15 min；
⑤甩掉血清，滴加30 μl 1:100 SP抗体，空白对照片加30 μl抗体缓冲稀释夜,湿盒内4℃过夜；
⑥0.01 mol/L,pH 7.4 PBS 漂洗3 min×3次；
⑦滴加链霉卵白素-辣根过氧化物酶(HRP-Streptavidin) ......
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