反复自然流产患者外周血中CD94-含量相关性分析
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【摘要】 目的 研究原因不明反复自然流产(RSA)患者外周血中NK细胞表面抗原标志CD94含量变化及其相关性，探讨CD94在原因不明RSA发病中的作用。方法 资料来源：选自妇产科患者RSA组30例、RSA已孕组15例、正常妊娠组15例、正常非孕组15例，检测四组研究对象外周血中CD94阳性细胞占淋巴细胞总数的百分数。结果 ①RSA未孕组外周血中CD94的水平(21.72±6.73)%较正常非孕组妇女(26.06±2.50)%有明显降低(P<0.05)；②RSA已孕组外周血中CD94水平(21.30±3.38)%比正常妊娠组(26.97±3.23)%低(P<0.05)。结论 CD94的表达降低与RSA的发病有关。
【关键词】反复自然流产；自然杀伤细胞；CD94
1 资料与方法
1.1 研究对象
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1.1.1 RSA未孕组 为30例于2004年12月至2005年10月就诊于我院妇产科门诊的RSA患者，年龄23~33岁，平均26.8岁，自然流产次数≥3次，排除染色体、解剖、内分泌异常、感染及自身免疫性疾病。所有病例均于门诊就诊时抽取外周静脉血。
1.1.2 RSA已孕组 为15例同期选取的早期妊娠者，既往有过2次及以上的自然流产史，并且本次妊娠已经确诊为胚胎停育或难免流产。年龄23~30岁，平均25.7岁，于清宫手术前抽取外周静脉血。
1.1.3 正常妊娠组 为15例同期选取孕37~57 d要求人工流产术的正常妊娠妇女，年龄22~33岁，平均26.2岁，既往无不良孕产史及上述疾病史，人流前均做B超证实为宫内孕单活胎，无任何流产迹象。于清宫手术前抽取外周静脉血。
1.1.4 正常非孕组 为15例同期选取的要求放置宫内节育器的正常非妊娠妇女，年龄24~31岁，平均25.73岁，既往均有正常分娩史，近期无任何感染征象，于上环前抽取外周静脉血。
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1.2 方法
1.2.1 病史采集 各组均排除遗传基因异常、解剖畸形、感染、内分泌异常及自身免疫等疾病。B超及妇科检查，盆腔区域均无任何异常。RSA未孕组患者和RSA已孕组人流术后2个月时检查卵泡刺激素(FSH)、黄体生成激素(LH)、孕激素(P)、雌激素(E2)、雄激素(T)、催乳激素(PRL)和甲状腺激素(T3、T4)、空腹血糖以及血胰岛素水平均在正常值范围。
1.2.2 主要仪器与试剂 FACS Calibur流式细胞仪美国BD公司,LDZ5-2普通离心机北京医用离心机厂,AD450全自动酶标分析仪美国贝克曼-库尔特公司,WS27恒温水浴箱美国SHELLAB.US公司,CD94-FITC试剂美国Biolegend公司。
1.2.3 标本采集 各组均抽取前臂肘静脉血4 ml，其中2 ml置于含有EDTAK2抗凝剂的无菌玻璃试管中，8 h内送流式检测；其余2 ml置于无菌不含抗凝剂的塑料试管中，室温下待其自然凝固后，2000转/min，离心10 min，取上层血清置于另一个无菌不含抗凝剂的塑料试管中，置-20℃冰箱保存待测。
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1.2.4 流式细胞分析 采用流式细胞分析方法检测四组研究对象外周血中CD94阳性细胞占淋巴细胞总数的百分数1.3 统计学方法 所有结果均用均数±标准差表示，采用单因素方差分析对各组结果进行组间差异性分析。统计学处理应用SPSS12.0统计软件进行处理，P<0.05，为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 RSA未孕组患者和正常非孕组妇女外周静脉血中CD94的水平变化 RSA未孕组患者外周静脉血中CD94的水平为(21.72±6.73)%，较正常非孕组妇女的(26.06±2.50)%有明显降低(P<0.05)。
2.2 RSA已孕组患者和正常妊娠组妇女外周静脉血中CD94的水平变化 RSA已孕组患者外周静脉血中CD94水平(21.30±3.38)%，与正常妊娠组的(26.97±3.23)%比较有明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)。
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3 讨论
反复自然流产(RSA)是指连续发生了3次或3次以上孕20周以前的自然流产，其发生率约占妊娠总数的1.0%，占自然流产数的15%。RSA是妊娠期常见并发症，其病因涉及遗传基因缺陷、外界不良因素、母体的全身性疾病、生殖器官畸形、内分泌功能失调、胎盘功能不足、感染及胚胎畸形等因素[1].
本研究发现：在RSA非孕组患者外周血中CD94的表达量为(21.72±6.73)%，而正常非孕组为(26.06±2.50)%，可以看出RSA非孕组患者外周血中CD94的表达较正常非孕组妇女
显著降低，差异有统计学意义(P<0.05)。在RSA已孕组患者外周血中CD94的表达量为(21.30±3.38)%，而正常妊娠组为(26.97±3.23)%，与正常妊娠组相比，RSA已孕组患者外周血中CD94的表达也是显著降低，差异有统计学意义(P<0.01)。提示RSA患者无论是在孕期还是非孕期，CD94的表达都比正常妇女同期CD94的表达降低，而作为NK细胞的抑制性受体，CD94表达的降低引起NK细胞的细胞毒活性增强，对胚胎的营养作用减弱而杀伤作用增强，阻碍滋养细胞的侵蚀，导致流产。
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综上所述，CD94在外周血中正常含量的对维持妊娠的顺利进行可能起重要作用。
参考文献
[1] Pandey MK,Rani R,Agrawal S.An update in recurrent spontaneous abortion.Arch Gynecol Obstet,2005,272:95-10.
[2] Yamada H,Shimada S,Morikawa M,et al.Divergence of natural killer cell receptor and related molecule in the decidual from sporadic miscarriage with normal chromosome karyocyte.Mol Hum Reprod,2005,11(6):451-457., 百拇医药(王艳丽)