TCT联合HPV检测在诊断子宫颈疾病中的应用
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【摘要】 目的 评价TCT联合HPV在子宫颈病变的诊断价值。方法 对发现宫颈异常的患者同时TCT(ThinPrep Cytology Test)及高危HPV检测，对一项或两项异常者行病理组织学检查，并以病理结果为金标准。对380例病理结果阳性(CINⅠ、CINⅡ、CIN Ⅲ、宫颈浸润癌)的患者，比较两种方法的检出敏感度。结果TCT检测阳性者301例，敏感度为79.2%，HPV DNA检测阳性329例，敏感度86.6%，与TCT检测的敏感度相比差异有统计学意义(P<0.05))。结论 对于宫颈癌及其癌前病变的筛查及早期诊断，应以宫颈细胞学检查和高危HPV检测相互结合以提高检出率，降低假阴性。
【关键词】TCT；HPV检测；宫颈病变
宫颈癌是常见的女性生殖道恶性肿瘤之一，严重地威胁着妇女的健康和生命。由于宫颈癌存在着一个较长的、可逆转的癌前病变期，早期宫颈癌患者5年治愈率高达90%，因此对宫颈癌的筛查研究一直受到人们的关注[1]。TCT新伯氏膜式液基薄层细胞学制片机，是1996年获美国FDA批准用于临床的，该方法对传统的巴氏涂片法带来了重大影响，是一项对我国产生影响较大的、有代表性的细胞学新技术。研究已证明人乳头状瘤病毒 (HPV)感染是宫颈癌及宫颈上皮内瘤变的主要病因[2]，并且将检测HPV感染作为诊断宫颈癌的一种辅助筛查手段。本研究对因宫颈病变的患者同时进行TCT检测及高危HPV检测，探讨其各自在诊断宫颈癌及其癌前病变中的作用。
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1 资料与方法
1.1 一般资料 2006年8月至2007年12月在本院妇科门诊就诊，对有宫颈异常的患者同时进行TCT检查及高危HPV检测，因检查方法中的一项或多项异常而行病理活检，并以病理组织学为金标准，其结果呈阳性(CIN I、CIN II、CINⅢ、宫颈浸润癌)的患者共380例。年龄34～65岁，平均(41.4+2.4)岁，产次0～3次，平均 1.8次。
1.2 方法
1.2.1 采用TCT行宫颈细胞学检查 检查前3 d不使用阴道内药物，不做阴道冲洗，24 h内禁止性行为，并在非经期检查。将塑料采集器上的脱落细胞洗入装有细胞保存液的小瓶中，然后送到细胞室，采用新柏式2000全自动制片机进行程序化处理，具体程序为细胞混均-细胞负压过滤膜采集-细胞转移，即可在载玻片上制成直径2 cm的细胞薄层，然后用95%乙醇固定15 min，经巴氏染色法染色后凉干、封片。
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1.2.2 HPV DNA检测 用无菌棉拭子插入宫颈口，均匀用力旋转5周，取出后置于无菌试管中，用聚合酶链反应(PCR-荧光法)技术检测标本中的HPV DNA。DNA扩增仪为珠海黑马公司提供的Hema8000型。PCR检测试剂盒由广州华银基因科技有限公司提供，检测HPV 6、11、16、18、33型。
1.2.3 病理学检查 阴道镜下对病变最严重处多点取材活检；如无异常，则常规取移行带第3、6、9、12点四处。本研究以病理组织学结果为标准：活检异常标准为CINⅠ、CINⅡ、CIN Ⅲ、宫颈浸润癌。
2 结果
本研究共有380例阳性患者，两种方法检出的病理阳性例数、敏感度及所检出的病理结果见表1、2。
3 讨论
如何早期诊断宫颈癌及其癌前病变，对于宫颈癌的早期预防治疗有着十分重要的意义。传统的巴氏涂片在妇女宫颈癌的筛查中，起了非常重要的作用，而宫颈细胞学诊断的准确率与涂片的制作质量有着重要关系。在传统巴氏涂片中，53%～90%假阴性的原因是涂片中没有能诊断的细胞[3]，主要原因有：80%以上的细胞随取材器丢失，没有被转移到载玻片上；涂片质量差，不均匀、过厚、过多的黏液、血液或炎细胞遮盖了不正常细胞，有40%的涂片因涂片质量影响正确诊断。TCT改变了常规涂片操作的方法，取材器上的脱落细胞几乎全部洗入保存瓶中，经Thinprep 2000程序化处理，使黏液、血液、炎细胞与上皮细胞分离，制成了均匀的薄层涂片，使细胞学检出率明显地提高，降低了假阴性的比例。本组研究中TCT检出阳性301例，敏感度79.2%，假阴性79例，占28.8%。与传统的巴氏涂片细胞学检查相比，有更高的诊断符合率。
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研究已证明人乳头状瘤病毒 (HPV)感染是宫颈癌及宫颈上皮内瘤变的主要病因[2]，并且将检测HPV感染作为诊断宫颈癌的一种辅助筛查手段。本组HPV阳性患者进行宫颈活检，病理阳性329例，其敏感度86.6%，与TCT敏感度相比有显著差异(P<0.05)。高危型HPV成为宫颈癌和宫颈上皮内瘤变(CINⅡ、Ⅲ)高发的主要危险因素。本研究病理阳性的患者中，高度病变CINⅡ、CIN Ⅲ及浸润癌HPV阳性率为92.5%，与TCT的高度病变的阳性率83.6%相比，差异有统计学意义(P<0.05)。因近85%～90%的妇女在8～10个月左右HPV会消失，因此，HPV假阳性高于TCT，即HPV阳性并不一定说明宫颈上皮的恶变。但考虑到其阳性结果的重要性，HPV检测在宫颈癌高发人群中进行筛查是有必要的。当然，其检测的效果在较高年龄的女性最佳。
由此可见，联合应用多种方法进行宫颈病变的筛查，可有效准确地筛查出病员，为宫颈癌的防治起到积极作用。联合HPV DNA的检测可以增加宫颈病变的阳性检出率，从而减少漏诊，可有效准确地筛查出病员，为宫颈癌的防治起到积极作用。
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参考文献
[1] David M Eddy. Screen for cervical cancer. Ann intern Med, 1990, 113:214-226
[2] Richart RM.Cause and management of cervical intraepithelial neopla sia .Cancer，1987,60(8):1951-1959.
[3] Northfelt DW.Cervical and anal neoplasia and HPV infection in pers on with HIV infection .Oncology,1990,8:337., 百拇医药(江 俐)