ATP在大鼠胰岛分离中的保护作用研究(2)
1.8 葡萄糖刺激胰岛素释放实验检测胰岛功能 纯化后的胰岛经Hanks液洗涤3次,分别转移至无糖,低糖(2.7 mmol/L)和高糖(16.7 mmol/L)无血清RPML-1640培养基中,每孔100个胰岛,于37℃,5%CO2培养箱内培养2 h,收集培养液,用大鼠胰岛素ELISA试剂盒进行检测,测定培养液中的胰岛素水平。
1.9 统计学方法 计量资料均以均数±标准差(x±s)表示。使用SPSS 11.5软件,采用两个样本t检验及两组样本率比较的秩和检验,P<0.01为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 ATP处理对胰岛产量的影响 分离纯化后的胰岛数量,ATP处理组的胰岛产量(312.3±6.2)个较对照组(306.5±5.6)个之间差别无统计学意义(P>0.05)。
2.2 原位末端核苷酸标记法检测胰岛细胞凋亡 胞核呈深棕色的阳性细胞为凋亡细胞。光镜下观察结果显示,处理组的阳性细胞数量明显少于对照组。见图1:
2.3 Annexin V/PI双染色检测胰岛凋亡结果 通过流式细胞仪定量检测胰岛细胞凋亡,结显示ATP处理组的平均细胞凋亡率为(8.6±2.9)%,而对照组为(22.7±3.1)%,处理组的胰岛细胞凋亡率明显低于对照组(P<0.01) ......
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