全硫代反义寡核苷酸对卵巢癌细胞生长抑制作用(3)
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①阳性对照组加入50 μl阳性对照液；阴性对照组加入50 μl阴性对照液；空白对照组加入50 μl空白对照液；各实验组分别加入50 μl不同浓度药物的提取物;②8组中每孔都加入50 μl酶联反应物，轻轻混匀,30 s后用自黏封孔盖箔封住板孔,37℃温育60 min;③洗板时甩尽板内液体，8组中每孔内分别加入洗涤液350 μl洗涤反应板,并去除水滴(在厚叠吸水纸上拍干)，反复洗涤5次;④8组中每孔依次加入50 μl底物A和50 μl底物B;⑤8组中每孔加100 μl终止液轻轻混匀30 s，30 min内在450 nm处读OD值(再换算成A值)。
结果判断：检测组的A值与空白组的A值之比(index)≥1.00为阳性，在0.91~0.99之间为可疑阳性：≤0.90为阴性。
1.2.3.4 吖啶橙染色法观察细胞形态 取对数生长期细胞1×105/ml接种于24孔板中，细胞接种、转染和培养方法同上。10 mg吖啶橙溶解于100 ml pH值为6.8的PBS中，4℃避光保存。取转染3 μmol/L PS-ASODN 和3 μmol/L PS-SODN 72 h后的细胞，按照说明书操作，荧光显微镜观察细胞形态。
1.2.3.5 MTT法测定PS-ASODN对卵巢癌HO-8910细胞增殖的影响 细胞以5×104/ml密度接种在96孔培养板上 ......
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