Id1 miRNA表达载体构建与转染乳腺癌细胞(1)
【摘要】 目的 构建正义、反义Id1真核表达载体,并成功转染乳腺癌MDA-MB-231细胞系,筛选稳定表达细胞株。方法 设计针对Id1基因的mRNA效的干扰序列。将干扰序列插入pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR 表达载体,构建Id1 miRNA真核表达载体,脂质体转染法转染乳腺癌MDA-MB-231细胞系,杀稻瘟霉素筛选稳定表达的细胞株。结果 Id1 miRNA真核表达载体的构建后,经酶切及测序鉴定正确后。转染乳腺癌MDA-MB231细胞系。经过2周杀稻瘟霉素筛选,获得稳定表达的细胞系。经RT-PCR鉴定,转染Id1 miRNA真核表达载体的细胞系Id1表达水平低于对照组。未转染组与阴性对照转染组无明显差异。【关键词】Id1; 真核表达载体; 乳腺癌
Construct the eukaryotic expression vector of Id1 miRNA and transfect into breast caner cell line
XU Zi-zhi,WANG Chuan.Institute of Tumor Disease, Union Hospital, Fujian Medical University, Fuzhou 350001,China ......
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