未刺激的未成熟卵体外培养在多囊卵巢综合征患者中的应用(1)
【摘要】 目的 探讨未刺激的未成熟卵体外培养成熟(IVM)治疗难治性多囊卵巢综合征(PCOS)患者的疗效。方法 2005年10月至2006年10月本中心对50例难治性PCOS患者65个周期的IVM治疗。结果 9个周期取消，取消率为13.85%；65个周期共获卵1 338枚，平均每周期20.6枚，培养48 h后总成熟率为68.5%。正常受精率为70.2%，卵裂率为91.1%，每穿刺周期和移植周期的临床妊娠率分别为37.5%和40.6%，28例临床妊娠中，6例多胎，多胎妊娠率为21.4%。结论 未经刺激的IVM技术用于难治性PCOS是一种有效的方法，可获得与常规体外受精-胚胎移植(IVF-ET)相似的临床妊娠率。
【关键词】多囊卵巢综合征；未成熟卵体外培养成熟；体外受精-胚胎移植
In vitro maturation and fertilization of unstimulated inmature oocyte for treatment of infertility women withpoly cystic ovary syndrome
, 百拇医药
ZHAO Cai-yan,MEI Li，LIU Li.
Shenyang No.204 Hospital,Liaoning 110043,China
【Abstract】 Objective To evaluate the clinical application of in vitro maturation(IVM)of unstimulated inmature oocytein the treatment of infertility women with polycystic ovary syndrome.Methods Between Oct.2005 and Oct.2006,65 cycles of IVM in 50 infertility women with obstinate polycystic otaty syndrome(PCOS)were carried out.Results 9 cycles were cancelled and cancellation rate was 13.85%；a total of 1338 inmature oocytes were obtained in 65 cycles with the average number of 20.6 per cycle.A total of 643 oocytes were normally fertilized by ICSI 70.2%，with a cleavage rate of 91.1%.28 clinicat pregnancies were obtaind.Pregnancy rate was 37.3%per puncture and 40.6%per transfer.Among the 28 cases 6 cases were multipregnancy.The multipregnancy rate were 21.4%.Conclusion Our results shows that IVM of unstimulated in mature oocytes is an effective method for the treatment of infertility women with obstinate PCOS which maybe offered as an altimative to conventiona lVF.
, 百拇医药
【Key words】Polycystic ovary syndrome;In vitro maturation;In vitro fertilization
1 资料与方法
1.1 一般资料 从2005年10月至2006年10月本中心对50例难治性PCOS患者65个周期的IVM治疗。PCOS诊断标准为：①长期无排卵;②临床和生化指标提示有高雄激素血症存在，并排除其他可致高雄激素血症的疾病。
1.2 方法
1.2.1 未成熟卵的采集 自然月经周期或撤退性出血的第3~5天行阴道超声检查，由专人测量子宫内膜厚度及记录两侧卵巢的窦卵泡数。未经刺激，于周期的第10~12天，行阴道B超监测，如双侧卵巢中无直径大于8 mm的卵泡，即肌内注射人绒毛膜促性腺激素(HCG)10 000 U，并于36 h后在丙泊酚静脉注射下经阴道超声引导行卵泡穿刺获卵。
, http://www.100md.com
1.2.2 IVM和胚胎培养 把抽到的血性卵泡液的1 ml平铺放在拾卵皿(FocoB003)，显微镜下观察拾卵，将卵子放入体外成熟培养体系，即为TCM-199培养液(美国Sigma公司产品)+20%胎中血清(杭州四季青公司产品)+0.075 n/ml FSH+0.1 U/ml 人绒毛膜促性腺激素(HCG，瑞士Serono公司产品)中，于体外培养24~48 h，待极体沾液后，行ICSI，之后将部分卵母细胞移入CM(Ceunin公司产品)中培养液，18 h后观察受精情况，继续培养24~48 h，直至胚胎移植，移植前常规行激光辅助孵化。
1.2.3 子宫内膜的准备 于IVM周期第3~5天戊酸雌二醇(补佳乐、德国先灵公司)2 mg/d,如取卵第8天内膜厚度小于7 mm，则增至6~10 mg/d,于移植日减为4 mg/d;如取卵日内膜厚度大于7 mm,增至4 mg/d; ICSI当天开始肌内注射黄体酮80 mg/d,连续两周。
1.2.4 胚胎移植及黄体支持 于ICSI受精后的第2~3天实行宫腔内胚胎移植(ET)，ET后2周行尿妊娠试验，若阳性继续服用戊酸雌二醇4 mg/d 和肌注黄体酮80 mg连续2周，ET后4周行超声检查确定胎囊及胚胎发育情况，若情况良好，黄体酮减为60 mg，否则维持原剂量直至90 d停药。
, 百拇医药
2 结果
2.1 IVM的实验室结果 50例患者共进行65个周期，其中4例患者因获卵母细胞少而放弃，4例患者获得的未成熟卵母细胞培养48 h后不成熟，一例患者获卵母细胞30个，有受精但无裂卵。因此9例取消，取消率为13.85%(9/65)，其余41例患者共移植56个周期，获得未成熟卵母细胞851个，平均每周期15.2个，体外培养48 h后，卵母细胞成熟620个，成熟率为72.9%，行ICSI后卵母细胞正常受精640个，受精率为75.2%，卵裂582个，卵裂率为90.9%。 2.2 IVM的临床结果 移植56年IVM周期中，共移植202个胚胎，平均3.78个(2~6个)，50例患者中，1例生化妊娠，22例获得临床妊娠,每取卵周期的临床妊娠率为40%(22/56)，2例3胎妊娠，于妊娠8周成功减为双胎，6例双胎妊娠，多胎妊娠率为36.4%。
3 讨论
目前对难治性PCOS不孕患者尚无有效的治疗方法，而IVM技术主要针对一些卵子成熟障碍的不孕患者，尤其对于PCOS无排卵者已有较多研究且获得了较高的临床妊娠率[2]对于应用促性腺日后是否真正有益于IVM结构，存有争议[3-5]。本生殖中心采用未经刺激的IVM技术可获得与常规IVF或ICSI相媲美的临床妊娠率，其优势在于：①未用任何促排卵药，节约近一半的费用；②监测过程简单，减轻患者的日程负担；③由于未用药物刺激，治疗周期缩短，且可继续进行；④避免其他辅助生殖技术中使用促性腺激素超促排卵的近期并发症及远期并发症；⑤即使本周期未成功，但穿刺本身可改善PC0S患者体内的不良的分泌环境，对于不伴其他因素的PCOS患者，IVM后可自然恢复排卵并妊娠；⑥穿刺简便安全。由于IVM在PCOS的应用中，具有很大的优势，关于PCOS患者采取前是否需要用少量的促性腺激素，争取获得最好质量和最多数目的不成熟卵母细胞，提高IVM成熟的卵母细胞质量，进而提高临床的妊娠率，将是IVM在PCOS中应用研究的热点。, 百拇医药(赵彩岩 梅 丽 刘 丽)
【关键词】多囊卵巢综合征；未成熟卵体外培养成熟；体外受精-胚胎移植
In vitro maturation and fertilization of unstimulated inmature oocyte for treatment of infertility women withpoly cystic ovary syndrome
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ZHAO Cai-yan,MEI Li，LIU Li.
Shenyang No.204 Hospital,Liaoning 110043,China
【Abstract】 Objective To evaluate the clinical application of in vitro maturation(IVM)of unstimulated inmature oocytein the treatment of infertility women with polycystic ovary syndrome.Methods Between Oct.2005 and Oct.2006,65 cycles of IVM in 50 infertility women with obstinate polycystic otaty syndrome(PCOS)were carried out.Results 9 cycles were cancelled and cancellation rate was 13.85%；a total of 1338 inmature oocytes were obtained in 65 cycles with the average number of 20.6 per cycle.A total of 643 oocytes were normally fertilized by ICSI 70.2%，with a cleavage rate of 91.1%.28 clinicat pregnancies were obtaind.Pregnancy rate was 37.3%per puncture and 40.6%per transfer.Among the 28 cases 6 cases were multipregnancy.The multipregnancy rate were 21.4%.Conclusion Our results shows that IVM of unstimulated in mature oocytes is an effective method for the treatment of infertility women with obstinate PCOS which maybe offered as an altimative to conventiona lVF.
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【Key words】Polycystic ovary syndrome;In vitro maturation;In vitro fertilization
1 资料与方法
1.1 一般资料 从2005年10月至2006年10月本中心对50例难治性PCOS患者65个周期的IVM治疗。PCOS诊断标准为：①长期无排卵;②临床和生化指标提示有高雄激素血症存在，并排除其他可致高雄激素血症的疾病。
1.2 方法
1.2.1 未成熟卵的采集 自然月经周期或撤退性出血的第3~5天行阴道超声检查，由专人测量子宫内膜厚度及记录两侧卵巢的窦卵泡数。未经刺激，于周期的第10~12天，行阴道B超监测，如双侧卵巢中无直径大于8 mm的卵泡，即肌内注射人绒毛膜促性腺激素(HCG)10 000 U，并于36 h后在丙泊酚静脉注射下经阴道超声引导行卵泡穿刺获卵。
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1.2.2 IVM和胚胎培养 把抽到的血性卵泡液的1 ml平铺放在拾卵皿(FocoB003)，显微镜下观察拾卵，将卵子放入体外成熟培养体系，即为TCM-199培养液(美国Sigma公司产品)+20%胎中血清(杭州四季青公司产品)+0.075 n/ml FSH+0.1 U/ml 人绒毛膜促性腺激素(HCG，瑞士Serono公司产品)中，于体外培养24~48 h，待极体沾液后，行ICSI，之后将部分卵母细胞移入CM(Ceunin公司产品)中培养液，18 h后观察受精情况，继续培养24~48 h，直至胚胎移植，移植前常规行激光辅助孵化。
1.2.3 子宫内膜的准备 于IVM周期第3~5天戊酸雌二醇(补佳乐、德国先灵公司)2 mg/d,如取卵第8天内膜厚度小于7 mm，则增至6~10 mg/d,于移植日减为4 mg/d;如取卵日内膜厚度大于7 mm,增至4 mg/d; ICSI当天开始肌内注射黄体酮80 mg/d,连续两周。
1.2.4 胚胎移植及黄体支持 于ICSI受精后的第2~3天实行宫腔内胚胎移植(ET)，ET后2周行尿妊娠试验，若阳性继续服用戊酸雌二醇4 mg/d 和肌注黄体酮80 mg连续2周，ET后4周行超声检查确定胎囊及胚胎发育情况，若情况良好，黄体酮减为60 mg，否则维持原剂量直至90 d停药。
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2 结果
2.1 IVM的实验室结果 50例患者共进行65个周期，其中4例患者因获卵母细胞少而放弃，4例患者获得的未成熟卵母细胞培养48 h后不成熟，一例患者获卵母细胞30个，有受精但无裂卵。因此9例取消，取消率为13.85%(9/65)，其余41例患者共移植56个周期，获得未成熟卵母细胞851个，平均每周期15.2个，体外培养48 h后，卵母细胞成熟620个，成熟率为72.9%，行ICSI后卵母细胞正常受精640个，受精率为75.2%，卵裂582个，卵裂率为90.9%。 2.2 IVM的临床结果 移植56年IVM周期中，共移植202个胚胎，平均3.78个(2~6个)，50例患者中，1例生化妊娠，22例获得临床妊娠,每取卵周期的临床妊娠率为40%(22/56)，2例3胎妊娠，于妊娠8周成功减为双胎，6例双胎妊娠，多胎妊娠率为36.4%。
3 讨论
目前对难治性PCOS不孕患者尚无有效的治疗方法，而IVM技术主要针对一些卵子成熟障碍的不孕患者，尤其对于PCOS无排卵者已有较多研究且获得了较高的临床妊娠率[2]对于应用促性腺日后是否真正有益于IVM结构，存有争议[3-5]。本生殖中心采用未经刺激的IVM技术可获得与常规IVF或ICSI相媲美的临床妊娠率，其优势在于：①未用任何促排卵药，节约近一半的费用；②监测过程简单，减轻患者的日程负担；③由于未用药物刺激，治疗周期缩短，且可继续进行；④避免其他辅助生殖技术中使用促性腺激素超促排卵的近期并发症及远期并发症；⑤即使本周期未成功，但穿刺本身可改善PC0S患者体内的不良的分泌环境，对于不伴其他因素的PCOS患者，IVM后可自然恢复排卵并妊娠；⑥穿刺简便安全。由于IVM在PCOS的应用中，具有很大的优势，关于PCOS患者采取前是否需要用少量的促性腺激素，争取获得最好质量和最多数目的不成熟卵母细胞，提高IVM成熟的卵母细胞质量，进而提高临床的妊娠率，将是IVM在PCOS中应用研究的热点。, 百拇医药(赵彩岩 梅 丽 刘 丽)