en橙皮甙对H2O2诱导大鼠心肌细胞凋亡的影响(1)
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【摘要】 目的 研究橙皮甙对H2O2诱导的大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法 培养并鉴定SD乳鼠心肌细胞;用H2O2诱导培养的大鼠心肌细胞凋亡,观察不同浓度橙皮甙(10-8 mmol/L、10-5 mmol/L、10-3 mmol/L)对SD乳鼠心肌细胞作用4、8、12 h后,用Tunel法检测心肌细胞凋亡。结果 橙皮甙组与模型组比较有抑制SD乳鼠心肌细胞凋亡的作用,且效应随橙皮甙浓度的增加和时间的延长而增强(P<0.01)。结论 橙皮甙对H2O2诱导的心肌细胞凋亡有抗凋亡保护心肌细胞的作用。
【关键词】 心肌细胞凋亡;橙皮甙;过氧化氢
柑橘类水果中重要的黄酮类化合物-橙皮甙具有清除羟自由基、体外抗LDL氧化修饰、减轻试验性家兔动脉粥样病变等作用[1-3],橙皮甙对损害的心肌细胞是否有保护作用是我们感兴趣的问题。本文采用胰蛋白酶消化法分离SD乳鼠心肌细胞进行体外培养,并用H2O2诱导的心肌细胞凋亡,制造心肌细胞凋亡模型,观察低、中、高不同浓度橙皮甙剂量组对H2O2诱导的心肌细胞凋亡的影响,从细胞水平研究橙皮甙抗氧自由基损伤的作用。
1 材料与方法
1.1 实验动物 出生1~3 d SD乳鼠(雌雄不限),第三军医大学实验动物中心提供。
1.2 药品及试剂 小牛血清(杭州四季青生物公司),DMEM培养基、二甲基亚砜、30%H2O2、橙皮甙(Sigma公司),胰蛋白酶(华美生物工程公司),Tunel试剂盒(Rocho公司),AnnexinV-FITC试剂盒(南京凯基生物技术公司),二氨基联苯胺(DAB)、TritonX-100(北京中杉生物技术公司)。
1.3 心肌细胞分离、培养 取出生后 1~3 dSD 乳鼠心脏于 PBS 液中漂洗干净,将心室肌剪成 1~3 mm3小组织块,移入离心管,加入 0.125%胰蛋白酶于 37 ℃恒温摇床中消化20 min ......
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