【摘要】 多重置换扩增(multiple displacement amplification,MDA)作为一种新近的全基因组扩增(whole genome amplification,WGA)技术,能高效地获得均衡、稳定的大量DNA产物,从而满足多种研究对大量DNA的需求。因此MDA可用于处理有限的临床样本的基因组DNA,在肿瘤学的标志基因定位、杂合性缺失及临床诊断等方面得到应用。

    【关键词】 全基因组扩增;多重置换扩增;肿瘤

    1 多重置换扩增原理及特点

    多重置换扩增已被证明既可应用于环状DNA模板扩增[4]也可被用于线性DNA模板[1]。多重转换扩增是一种非PCR,等温不需要经过热循环的基因扩增技术。使用独特的Phi 29 DNA聚合酶,对于模板有很强的模板结合能力,能连续扩增100 kb的DNA模板而不从模板上解离,平均片段长度>10 kb[2]。

    多重置换扩增具有能直接分离样本和纯化样本均适用[3]、产量高且有长度保证[4]和无位点扩增误差等特点[5],保证了扩增产物的质量。

    2 多重置换扩增应用于肿瘤研究及临床应用

    多重置换扩增最先被应用于人类全基因组扩增[6],此后被更多地应用于真核细胞的研究,包括基因组测序和人类及灵长类的基因分型[7]、法医学中对低拷贝数DNA检验和混合斑中精子DNA扩增进行STR分型[8]等 ......