广西圆斑蝰蛇毒凝血因子X激活剂的分离纯化及其止血作用的研究(2)
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2.3 RVV-X的止血作用 本文所定义RVV-X活性单位是参考立止血的酶活性单位而定,1u是指1ml RVV-X溶液在37℃条件下与1ml含枸橼酸钠的标准人体血浆混合后加入1 ml 0.025 mol/L的氯化钙溶液能在(60±20)s内发生凝结。
2.3.1 RVV-X对家兔肝创伤出血模型出血时间及出血量的影响[6]
家兔24只,随机分为4组,每组6只,分别为RVV-X 0.02 u/kg、0.005 u/kg及0.00125 u/kg三个剂量组和立止血组(0.05 KU/kg)。家兔麻醉后仰位固定,分离出肝脏,在肝脏右叶中部做一切口(长1 cm,深0.5 cm)。将滤纸(8 cm×8 cm)称重后平铺于出血创面上用砝码加压(20 g),每15 s观察一次,直至停止出血,记录出血时间,并通过滤纸前后重量之差计算出血量。经兔耳缘静脉注入药物,15 min后在原切口旁约5 mm处做一相同切口,以同样方法测定用药后的出血时间和出血量。
2.3.2 RVV-X对家兔凝血时间的影响[7] 家兔分组和给药剂量同2.3.1。先测定家兔的正常凝血时间作为自身空白对照,而后由耳缘静脉注射药物,给药后10 min、30 min、1 h、3 h、6 h、12 h、24 h,用一次性注射器自耳中动脉取血1 ml置于长10 cm、内径1 cm的试管中(水浴恒温37℃),自血液进入注射器时开始计时,每15s将试管倾斜一次,观察血液的流动性,直至血液全部凝固为止。
2.3.3 RVV-X对肝素化小鼠凝血时间的影响[8] 小鼠60只,随机分为6组,每组10只。分为生理盐水组、肝素化模型组、肝素化模型+立止血0.025KU/kg组、肝素化模型+RVV-X0 ......
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