CD44v6及ezrin在胃癌中的表达及临床意义
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【摘要】 目的 探讨CD44v6、ezrin蛋白在胃癌组织中的表达及临床意义。方法 应用免疫组化S-P法,检测48例胃癌、20例正常胃组织中CD44v6、ezrin蛋白的表达。结果 CD44v6及ezrin蛋白在胃癌组织中的阳性率分别为66.67%(32/48)、58.33%(28/48),CD44v6及ezrin蛋白在正常胃组织阳性表达率为30.00%(6/20)、100.00%(20/20),有淋巴转移患者的Ezrin蛋白、CD44v6阳性率高于无淋巴转移患者(P<0.05); ezrin蛋白在胃癌组织中主要表达于胞浆,在正常肠组织主要表达于胞膜。结论 Ezrin蛋白、CD44v6的表达有助于综合判断胃癌的恶性程度和转移潜能。Ezrin蛋白有望成为判断预后的新指标。
【关键词】胃癌;蛋白质ezrin;CD44v6;免疫组织化学
作者单位:454002河南省焦作市人民医院内镜室
有研究表明,Ezrin蛋白的表达与胰腺癌、骨肉瘤等的侵袭和转移密切相关。CD44v6是同浸润、转移密切相关的细胞表面因子,它同Ezrin蛋白共同参与了肿瘤的转移[1]。本研究利用免疫组化方法检测胃癌手术标本的石蜡包埋组织中CD44v6、ezrin蛋白的表达情况,并分析其相互关系及与各种临床参数的关系,旨在探讨其在胃腺癌淋巴结转移、病理分级中的作用。
1 资料与方法
1.1 材料 本研究所用资料均系焦作市人民医院 2001~2009年手术切除的原发性胃腺癌标本。男30例,女18例;平均59岁。全部患者术前均未经过放化疗。术后病理诊断均确诊为腺癌,高分化癌13例,中分化癌20例,低分化癌15例;TⅠ期13例,TⅡ期20例,TⅢ期8例,TⅣ期7例;有淋巴结转移者30例,无淋巴转移者18例。
1.2 方法 免疫组织化学法:将10%福尔马林固定、石蜡包埋的癌组织制成4~5 μm切片,常规脱蜡,浸入0.01 mol/L、pH为6.0的枸橼酸盐缓冲液内,微波炉抗原修复10 min,温度为92~98℃。用SP法进行免疫组织化学染色。CD44v6、ezrin及SP试剂盒系北京中山生物试剂公司提供的Zymed公司产品。Ezrin和CD44v6阳性细胞呈棕黄色,阳性反应分布在细胞膜和细胞质,阳性细胞数目在10%~25%为(+),25%~50%为(++),超过50%为(+++)。每次实验均设阳性和阴性对照。用已知乳腺癌阳性切片作阳性对照,阴性对照用PBS代替一抗。
1.3 统计学处理 数据用均数±标准差(x±s)表示,采用SPSS12.0统计软件,多个样本均数比较采用方差分析、率采用χ.2检验,并进行直线相关分析,如有相关性则进行直线回归检验。P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 CD44v6和Ezrin在胃癌及正常胃组织中的表达 CD44v6及ezrin蛋白在胃癌组织中的阳性率分别为66.67%(32/48)、58.33%(28/48),CD44v6及ezrin蛋白在正常胃组织阳性表达率为30.00%(6/20)、100.00%(20/20),CD44v6在有、无淋巴转移患者的阳性率分别为90.00%(27/30)、16.67%(3/18)(P<0.05);ezrin蛋白在有、无淋巴转移患者的阳性率分别为80.00%(24/30)、22.22%(4/18)(P<0.05)。此外,ezrin蛋白在胃癌组织中主要表达于胞浆,在正常肠组织主要表达于胞膜。
表1
CD44v6和Ezrin在胃癌组织中不同临床参数的
阳性表达率
临床参数例数
CD44v6Ezrin
+%+%
高分化13538.461184.62
中分化201575.001260.00
低分化151280.00533.33
Ⅰ期13753.851184.62
Ⅱ期201365.001155.00
Ⅲ~Ⅳ期151280.00640.00
有淋巴结转移组302790.002480.00
无淋巴结转移组18316.67422.22
正常胃组织20630.0020100.00
2.2 Ezrin和CD44v6在胃癌组织中不同临床参数的阳性表达率 见表1。CD44v6在胃癌不同临床参数的阳性表达率不同,随着胃癌临床分期、病理分级的升高呈递增趋势,各组间差异有显著性(P<0.05)。Ezrin在胃癌不同临床参数的阳性表达率不同,随着胃癌临床分期、病理分级的升高呈递减趋势,各组间差异有显著性(P<0.05)。
2.3 胃癌组织中Ezrin和CD44v6表达的相关性 用Pearson相关分析对Ezrin和CD44v6进行相关性分析,二者有相关性,且呈负相关,其相关系数R=-0.426,方程式Y(Ezrin)=-0.336X(CD44v6)+0.168。
3 讨论
Ezrin是ERM蛋白家族中细胞内骨架蛋白,是膜蛋白和肌动蛋白细胞骨架的连接分子。其主要功能是调节细胞活动如生存、黏附、迁移、侵袭,这些活动在肿瘤发展和进程中都具有非常重要的作用。近年研究发现,Ezrin可通过对肿瘤细胞表面粘附分子(如CD44v6)的调节作用影响肿瘤的分化、侵袭性和转移[1]。
CD44基因是透明质酸受体,其变异体CD44v6在恶性肿瘤的高表达使瘤细胞对基质侵袭力增强,其与肿瘤的浸润、转移作用已经确定,且CD44基因蛋白对诊断肿瘤复发有一定的价值[2]。在本研究中发现,CD44v6在胃癌不同临床参数的阳性表达率不同,随着胃癌临床分期、病理分级的升高呈递增趋势;而Ezrin蛋白表达随着胃癌临床分期、病理分级的升高呈递减趋势,各组间差异有显著性(P<0 ......
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