Snail和IKKβ在非小细胞肺癌组织中的表达及意义
 |
| 第1页 |
参见附件(2965KB，2页)。
【摘要】 目的 探讨Snail和IKKβ在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及临床意义。方法 应用免疫组织化学方法检测45例NSCLC组织中Snail和IKKβ蛋白表达情况。结果 肺癌组织标本中，Snail和IKK的阳性表达率分别为68.9%、57.8%。Snail高表达与肺癌分化程度相关，IKKβ高表达与肺癌淋巴结转移相关。Snail蛋白的表达之间存在显著正相关。结论 NSCLC中存在Snail和lKKβ蛋白的高表达。NSCLC组织中Snail和IKKβ表达的上调，对肿瘤的发生、发展起着重要作用。
Snail是存在于果蝇、鼠和人等生物体内的一种碱性螺旋环螺旋转录调节因子，正常情况下主要表达于胎盘、胚胎中胚层和成人的某些中胚层来源的未分化组织。近期在多种人类上皮来源肿瘤中发现Snail表达增高，如乳腺癌、前列腺癌、胃癌等，这可能与Snail能介导上皮间充质转化(EMT)有关。IKKβ是IκB激酶，是一种很强的刺激细胞增殖的丝裂原，与其单一受体cMet结合后可以刺激肿瘤细胞的离散、增殖、血管形成、转移、侵袭等。我们利用免疫组织化学方法检测了非小细胞肺癌(NSCLC)组织中Snail和IKKβ的表达,探讨两者在肺癌发生、发展过程中的作用及其相互关系。
1 材料与方法
1.1 标本来源随机选取2006年2月至2010年2月手术切除NSCLC组织标本45例，其中鳞癌26例，腺癌19例；高、中分化30例，低分化15例；按UICC1997肺癌分期标准分期，Ⅰ、Ⅱ期32例，Ⅲ期13例；男28例，女17例。均为原发性肺癌，且术前未接受放化疗,取12例癌旁正常肺组织作为对照。
1.2 试剂 Snail兔抗人多克隆抗体Snail(H81，SC15393)购自美国Santa Cruz生物技术公司，IKKβ兔抗人多克隆抗体(bs1025R)购自北京博奥森生物技术有限公司，SP免疫组织化试剂盒(KIT9710)和DAB显色试剂盒(DAB0031)均购自福州迈新生物技术公司。
1.3 实验方法 肺癌标本经福尔马林液固定、常规石蜡包埋。每例连续切片3张,切片厚4μm,供常规HE染色和Snail、IKKβ免疫组织化学染色。Snail兔抗人多克隆抗体浓度为1∶150,IKKβ兔抗人多克隆抗体浓度为1∶50。参照检测试剂盒说明进行。
1.4 结果判断标准 两种蛋白染色阳性均为棕黄色，均表达于细胞浆。在10×40高倍视野下,随机选10个视野,计数肿瘤细胞中阳性比例计算百分率,阳性细胞<10%记为()；阳性细胞数在10%~25%记为(+)；阳性细胞数在25%以上50%记为(++)；阳性细胞数>50%记为(+++)。
1.5 统计学处理 应用SPSS 13.0统计分析软件进行统计学处理。采用χ2检验和Spearman等级相关分析,P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 NSCLC组织中Twist、IKKβ的表达 在45例NSCLC组织中，31例癌细胞Snail呈阳性[(+)(+++)]表达，阳性率为68.9%；26例癌细胞IKKβ呈阳性[(+)(+++)]表达，阳性率为57.8%。12例癌旁正常肺组织Snail、IKKβ阳性率分别为16.7%、8.3%。Snail和IKKβ阳性均表达于癌细胞胞浆中，为棕黄色，间质和血管均未见表达。
2.2 肺癌组织中Snail、IKKβ的表达与临床病理因素的关系 Snail的表达水平与肺癌的分化程度(P<0.05)相关，与患者的性别、年龄、病理类型、肿瘤直径、有无淋巴结转移和TNM分期无明显相关性(P>0.05)。IKKβ的表达水平与肺癌有无淋巴结转移(P<0.05)相关，与患者的性别、年龄、病理类型、肿瘤直径、分化程度、有无淋巴结转移和TNM分期无明显相关性(P>0.05)。
2.3 肺癌组织中Snail、IKKβ蛋白表达之间的关系 45例肺癌组织中Snail、IKKβ同时呈阳性[(+)(+++)]表达的有23例(51.1%),同时阴性表达的有11例(24.4%)。肺癌组织中Snail和IKKβ表达具呈显著正相关，P<0.01),见表1。
3 讨论
Snail基因首先在果蝇中被发现，随后相继在水母、文昌鱼、斑马鱼、非洲、蟾蜍、小鼠、大鼠以及人类中被确认[1]。人的Snail基因位于7p21.2，编码由202个氨基酸组成的蛋白质。Snail在胚胎生长发育阶段诱导细胞迁移过程中起关键的调控作用[2]，广泛表达于中胚层起源的组织细胞，在出生后降至极底水平。近期研究证实Snail参与了多种上皮来源的肿瘤细胞发生上皮间充质转化(EMT)并促进其侵袭转移。
IKKβ是IκB激酶及其受体(cMet)基因编码的蛋白产物是一对多功能配体/受体对，生理情况下调节细胞的运动、增殖和分化。而原癌基因在致癌因素作用下活化为癌基因，表达癌基因产物，使细胞发生异常分化、增殖及侵袭能力增强。研究证实IKKβ/cMet系统基因的异常表达与人类多种肿瘤的发生、浸润及转移有关。
因为Snail是上皮间质转变过程中的重要的调控因子，所以Snail与调节上皮间质转化过程的信号通路有关。IKKβ是IκB激酶能通过作用于RAS/MAPK或磷酯酰肌醇3激酶(PI3K)通路诱导某些上皮细胞发生上皮间质转化，提示可能会激活Snail的表达。
本文通过对非小细胞肺癌组织中Snail与IKKβ的表达进行检测分析,证实Snail在NSCLC组织中阳性率为68.9%，Snail高表达与肺癌分化程度相关(P<0 ......
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(2965KB，2页)。