孕鼠染铝对胎鼠脑皮质神经元的影响(2)
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1.4 图像分析 光镜下采用Mias图像分析软件，每个胎鼠脑取相同间隔的3张切片，对每张切片的相应部位各测3个视野，同一放大倍数，同一视场面积，同一背景光强度下，计数大脑皮质Par1区内椎体细胞层NSE免疫组化染色阳性细胞，测定NSE阳性反应产物的平均光密度值。
1.5 统计学方法 用SPSS12.0统计软件行统计处理，数据采用(x±s)表示，两样本对应参数平均值方差齐性用F检验，均值间比较用t检验；检验水准a=0.05。
2 结果
光镜下，正常对照组胎鼠大脑皮质Par1区内椎体细胞层NSE免疫组化染色阳性神经元较多，细胞呈圆形或椎体形，胞体发出突起伸向皮质表面，胞核位于中央，不着色，胞浆及突起内有丰富的棕黄色阳性反应产物，染色深，胞核大位于中央，不着色(图A)。染铝组胎鼠Par1区内椎体细胞层NSE阳性细胞较正常对照组胎鼠阳性细胞少，胞浆内棕黄色反应颗粒染色稍淡，胞体发出突起伸向皮质表面，胞核大位于中央，不着色(图B)。染铝组18 d胚胎脑皮质Par1区内椎体细胞层NSE阳性细胞数分别较对照组胚胎减少(P<0.05)，胞浆内NSE免疫反应阳性产物平均光密度降低(P<0.05),见表1。
3 讨论
神经元是神经系统的结构和功能单位，研究发现，许多神经系统疾病的发生都是由于神经元数量、形态或功能的异常所致。Al3+具有多种生物学效应导致神经元死亡,引起神经系统疾病。如铝与早老性痴呆、透析性脑病综合征密切相关[6]。铝可诱导大鼠脑神经元凋亡[7]，铝可对原代培养皮层神经细胞产生细胞毒性，抑制皮层神经细胞生长[8]。本实验研究发现孕鼠染铝，其胎鼠大脑皮质神经元与相应对照组胎鼠比较数量减少。综合文献资料，孕鼠染铝导致胎鼠大脑皮质神经元减少的原因如下：①孕期染铝，铝在胎鼠脑内蓄积，铝对神经元的毒性作用致使神经元数量减少；孕期染铝，铝在胎鼠脑内蓄积，铝可通过改变神经元的钙稳定，或与神经细胞的DNA结合[9]，以及铝蓄积产生活性氧等影响神经元结构和功能。另据Virgilia[10]等报道，铝致脑组织ATP酶活性降低，细胞膜完整性被破坏，可能也是铝的神经毒性机制之一;②孕鼠染铝，铝在胎鼠脑内蓄积，铝抑制胎鼠脑神经干细胞向神经元分化致使神经元数量减少；神经干细胞具有分化为神经元、星形胶质细胞及少突胶质细胞的能力，因此神经干细胞在神经系统发育过程中具有特别重要的作用。神经干细胞的分裂增殖受很多因素影响，包括基因方面、细胞因子、细胞外基质、细胞黏附分子等[11]。胡琼[12]等报道铝可抑制大脑皮层神经干细胞向神经元分化;③孕鼠染铝致胎鼠脑神经干细胞减少,使其分化的神经元数量减少。本人在前期研究中发现孕鼠染铝可导致仔鼠海马齿状回神经干细胞数量减少[13]，神经干细胞具有分化为神经元的能力，由于神经干细胞数量减少可能导致其分化的神经元数量减少。以上原因均可导致孕期染铝胎鼠脑神经元的减少，从而引起子代神经行为和智力发育的异常。
参 考 文 献
[1] 陈雅,张本忠.硫酸铝钾对小鼠胚胎中脑细胞增殖和分化的影响.中国职业医学,2007,12 (34): 458459.
[2] 李百祥,任锐,杨德文.氯化铝对原代培养大鼠大脑皮层神经细胞的毒性作用.中华劳动卫生职业病杂志,2006,24(3):179182.
[3] Yumoto S,Nagai H,Matsuzaki H,et al.Aluminium incorporation into the brain of rat fetuses and sucklings.Brain Research Bull,2001,55(2):229234.
[4] Corain B,Bombi G G,Tapparo A,et al.Aluminium toxicity and metal speciation: established data and open question.Coordination Chem Rev,2007,149(2):1122.
[5] 陈丽,张本忠.氟铝联合对大鼠胚胎发育毒性的体外实验研究.中国地方病学杂志,2007,26(2): 133136.
[6] 梁峰.铝与人类疾病研究现状.微量元素与健康研究,2006,23(1):6466.
[7] Victor J,Kim S,Raghubir P.Aluminummaltolate induces apoptosis and necuro2a cells:potential role for p53 signaling ......
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