ABO血型鉴定正反向定型不符的原因与分析
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【摘要】 目的 分析ABO血型正反向定型不符的原因及防治措施。方法 应用正反向定型、唾液血型物质测定试验及吸收放散试验，检测16例ABO血型正反定型不符标本。分析其原因，并正确分型。结果 本组16例出现正反向定型不符。其中冷抗体6例，血浆异常3例，ABO亚型3例，抗原或抗体减弱2例，人为操作因素和试剂因素2例。结论 对ABO血型正反向定型不符，无法定型的血液样本，可针对原因，采取多种方法，正确鉴定ABO血型。
【关键词】
ABO血型鉴定；正反定型不符；原因；解决方法
正确的血型鉴定，是保证临床输血安全和抢救生命的重要工作。输血前必须检查血型，选择血型相同的供血者，进行交叉配血，结果完全相合才能输血[1]。但在临床血型鉴定时，也会遇到正反向定型不符等情况，给临床输血带来隐患，2008年8月至2010年10月，我院共接受各科申请血型鉴定2380例，其中ABO血型正反定型不符16例，现分析如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 血型鉴定对象：2380例血型鉴定者，均为我院2008年8月至2010年10月间住院患者；其中男1630例，女750例；年龄1.6~86岁，平均58.6岁；正反向定型不符16例。
1.2 方法
1.2.1 试剂来源 正定型单克隆抗A、抗B、抗AB试剂由长春生物制品有限公司提供。反定型标准红细胞A、B、O有上海血液研究所提供。
1.2.2 鉴定方法 ①血型正反定型：玻片法和试管法；②唾液血型物质的检测：检测分泌型者唾液中的血型物质，并结合临床病史、用药史、输血史等为血型鉴定提供依据；③ABO亚型鉴定及抗人球蛋白试验、抗体鉴定试验等均按照文献操作[2]。
2 结果
本组血型鉴定者2380例，其中16例出现正反向定型不符。经过对16例血液样本各种方法的综合检查，其中冷抗体6例，血浆异常3例，ABO亚型3例，抗原或抗体减弱2例，人为操作因素和试剂因素2例。
3 讨论
3.1 血型鉴定的意义 随着现代工业、交通的发达，很多肿瘤、创伤的发病率呈上升趋势；而外科手术，器官移植，创伤急救等均需要进行治疗性输血。输血是抢救生命的重要措施。输血前必须检查血型，选择血型相同的供血者，进行交叉配血，结果完全相合才能输血。同时，对于新生儿溶血性疾病，也是主要通过血型血清学检查，才能作出诊断[1]。一旦血型鉴定有误，或输入不同血型的血液，就会发生溶血性反应，危及生命。所以，认真做好血型鉴定，对保证输血安全和输血治疗效果具有重要意义。
3.2 冷抗体因素及处理对策 冷抗体也就是天然抗体，是在没有任何可觉策的抗原刺激下而产生的抗体，以IgM为主，也可以是由一种无觉策的免疫刺激而得。正常情况下，健康人体内均含有少量的冷抗体，效价很低，一般在1∶16以下。分子量较大，不耐热，在在4~25℃盐水中与相应红细胞发生肉眼可见凝集，随着温度升高，活性降低；巯基乙醇或二硫苏糖醇可将其灭活[1]。对于支原体及病毒性肺炎、传染性单核细胞增多症、再生障碍性贫血，自身免疫性溶血性贫血、红斑狼疮等患者，其血清中具有较高效价的自身冷抗体，作用温度也相应升高，容易导致ABO正反向定型出现全凝集现象，无法鉴定血液样本的ABO血型。本组6例为冷抗体凝集，用37℃0.9%氯化钠注射液洗涤红细胞，操作时在37℃环境可以排除冷凝集素的干扰[3]。或血液样本已凝固者，选用巯基乙醇处理红细胞后再进行ABO正定型试验[4]，直至正反向定型结果一致。
3.3 血浆蛋白异常因素及处理 自制分型血清抗体效价太低，亲和力不强；纤维蛋白原增高或异常蛋白血症，如多发性骨髓瘤，巨球蛋白血症等可产生缗钱状凝集。患者输入高分子血浆代用品或静脉注射造影剂等药物，亦可引起红细胞聚集，误认为凝集。另外也有血清中存在不规则抗体，如A2和A2B型患者血清内有抗A1抗体，能凝集A1红细胞。胃癌、胰腺癌患者血中含有大量可溶性A或B物质，能中和血清中的抗体，从而抑制反应，造成假性不凝集。处理办法是将红细胞洗涤后再做实验[1]。
3.4 ABO血型亚型 同一血型抗原，但抗原结构和性能或抗原位点有一定差异。ABO血型系统中以A亚型最多见，A亚型有A1和A2亚型占全部A型的99.9%。本组ABO亚型3例，占%。尽管我国A2、A2B型在A与AB型中所占比例少于1%，但定型时易将弱A亚型无定为O型，如果给其输入O型血，不会有太大问题，如果把弱A型无定为O型，并输给O型血人，则受血者的抗A抗体就可能与输入的弱A亚型红细胞起反应，引起血管内溶血性输血反应。因此，应避免若的亚A型定位O型，如：Ax型红细胞与B型血清(含抗A抗体)不发生凝集，但与O型血清(含抗A、抗B、抗AB)发生不同程度的凝集，这可能是O型血中的抗A效价比B型血抗A效价高，所以，做ABO血型鉴定时，应加O型血清，以防将Ax型无定为O型。
3.5 抗原抗体减弱 本组2例，分析其原因是A或B的弱抗原易判为不凝集(假阴性)，而由细菌引起的获得性类B抗原易误判为阳性。有些细菌含有乙酰基酶，能使特异性A型物质末端的N乙酰氨基半乳糖水解成半乳糖，从而使A型获得类B抗原后易无定为AB型。白血病或某些恶性肿瘤能引起红细胞抗原性减弱，造成正定型凝集较弱，引起血型误定[1]。可以增加反应时间，在4℃下放置后再做鉴定，此时有必要增做吸收放散试验、唾液血型物质检测实验。并注意与亚型区别[5]。
3.6 人为操作因素 操作器材不洁，红细胞与血清比例不当，离心过度或不足，溶血现象，试验温度及信息登记差错。
3.7 血型鉴定注意事项 选用一次性器材，避免交叉污染；标准血清从冰箱取出后，待其平衡至室温后再用，用毕尽快放回冰箱保存；一般先加血请，再加红细胞悬液以便核实是否漏加血请；选择合适的操作温度；老年人，婴幼儿及恶性肿瘤患者最好采用试管法，玻片法反应时间不能少于10 min，否则，较弱凝集不能出现，造成假阴性。正反向定型结果一致才可以发报告。
总之，ABO血型鉴定正反向定型不符是由冷抗体，血浆蛋白异常，抗原抗体减弱及人为操作等因素造成的。检验人员应该严格遵守操作规程，熟练掌握各种试验技术，认真对待每一分待检标本，最终必须达到正反向定型结果一致，才可以发送血型鉴定结果，绝不可仅凭正向或反向单一结果而主客臆断。确保患者用血安全。减少医疗纠纷。
参 考 文 献
[1] 全国卫生专业技术资格考试专家委员会 ......
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