细菌性阴道病的诊断方法及治疗方案
细菌性阴道病(BV)为生育年龄妇女最常见的阴道感染，感染率较高，而且常易复发。本病的特征为阴道生态环境的改变，由大量致病性厌氧菌取代了正常的产生过氧化氢的乳酸杆菌，致病菌渐成优势菌，导致BV的发生。BV的检查在妇科、产科以及施行流产术中都有重要意义。本文旨在探讨国内常用的BV诊断方法及其应用价值。其中生化法和微生物酶快速检测法已成为BV 检测工作中最有前途、使用最广的主流方法。
1 Amsel 法
目前检测BV 的“金标准”，有四项指标：①均匀一致的稀薄白带，常附于阴道壁；②阴道pH 值>4.5；③阴道分泌物加入10%氢氧化钾出现胺味(即胺试验阳性)；④阴道分泌物镜检可见线索细胞。凡同时具备第4项及前3项中任意两项，即可诊断BV感染。尽管这种标准被广泛运用于BV的诊断，但易受人为因素与BV感染无关因素(如近期性交，滴虫感染，阴道灌洗，处于月经期或绝经后)等诸多因素的影响，主观性强，因而很难对其判定结果进行比校。
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2 细菌性阴道病病原菌检测
阴道加德纳菌(GV)是BV主要病原菌之一，目前主要的实验室诊断有：
2.1 革兰染色法[1]，革兰染色油镜下查找线索细胞,可见大量的GV附着在阴道上皮细胞上。Nugent等[2]提出的革兰染色细菌评分法是对BV 诊断的创新,他在镜下选出了3 种形态的菌群给出积分以诊断BV。此方法可在实验室内独立完成,并且能对阴道分泌物细菌进行鉴定和半定量检测,但缺点是对于中间态的标本不能确诊。革兰染色找加德纳菌和线索细胞,易于重复、便于保存,而且可以同时进行霉菌、淋球菌等的检测，但受到检验人员人为因素的制约。而且使用不同革兰染色试剂及操作方法可造成，判断为BV阳性的GV检出率差异显著[3，4]。
2.2 分离培养法 将阴道分泌物标本划种于GV分离培养基[5]，放厌氧培养箱于37℃微氧环境培养48 h。根据菌体，菌落及生化反应定种。鉴于BV患者GV培养阳性率低的状况,如果没有其他检验方法辅助信息的支持,容易造成误导。
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2.3 阴道加德纳菌抗体检测 采用酶标葡萄球菌A 蛋白(HRP SPA)检测细菌性阴道病患者血清中阴道加特纳菌抗体[6]。文章以HRP SPA用于ELISA技术中,代替第二抗体[7],检测患者血清中的GV抗体，解决了GV分离培养困难的问题,具有快速简便、试验稳定等优点。
2.4 聚合酶链反应技术 据陈汝光等报道[8]取宫颈分泌物，用PCR法测GV， BV阳性患者的检出率为25.5%，BV阴性妇女的检出率为4.6%。该法适用于反复发作，诊断前曾用过抗生素的病例。
3 微生物酶快速检测法
3.1 脯氨酸氨基肽酶(PIP)测定 PIP 是由阴道加德纳菌和动弯杆菌产生，是BV 相关病原体所分泌的特异性标志酶，故阴道分泌物中存在PIP 活性即可诊断BV[9]。
3.2 唾液酸酶测定 唾液酸酶法又称BLUE检测，它的实验原理是:BV蓝中主要含有细菌唾液酸酶专性可生色底物IBX 4041。当此溶液和细菌唾液酸酶接触时，会发生化学反应，产生唾液酸和IBX 4050， 加上一或两滴显色剂， 变成兰色，当细菌唾液酸酶缺乏时， 则不发生化学反应，溶液为黄色。国内、外均有研究报道BV 妇女阴道分泌物中唾液酸酶含量明显高于正常妇女，其唾液酸酶的活性甚至可以达到40 多倍[10]。
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3.3 BV三项联合检测法 它包括过氧化氢H202(阴道乳酸杆菌的标志物)、唾液酸苷酶Nacase(加德纳细菌、游动弯曲杆菌等BV致病菌的标志物)、白细胞酯酶LE(炎性细胞的标志物)三项指标[11]。BV三项联合检测是针对细菌性阴道病(BV)发生过程中的产H202乳酸杆菌减少，粒细胞被细菌毒素分解释放出白细胞酯酶，和致病的厌氧菌如加德纳细菌等的大量增殖、定居的过程来联合检测细菌性阴道病。
4 生化法
BV fast方法是根据检测阴道分泌物胺和pH原理制成，夏红[12]等报道临床上分离培养、BV fast、BV blue均可诊断细菌性阴道病，但BV fast更简便。
5 BV的治疗
目前，BV的治疗主要是选用抗厌氧菌药物，包括甲硝唑类药物及克林霉素等。BV的发生与阴道微生态失衡有关，因此近来提出用调整阴道内菌群的制剂来治疗BV，借以调整并保挣阴道微生态平衡，这样不但治愈BV而且可以防止其复发。
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首选甲硝唑500 mg，2次/d，共7 d；或200 mg，3次/d，共7 d；或2 g顿服，但少数患者出现胃肠道反应而不能耐受。口服替硝唑500 mg，2次/d，共6 d，其疗效与甲硝唑类似，副反应小。上述两种药物具有较强的抗厌氧菌作用,同时甲硝唑无抗乳杆菌作用,有助于阴道正常菌群的重建,故为治疗BV的首选药物。
微生态疗法是用从健康妇女阴道内分离出乳杆菌做主要成分制成微生态活菌制剂。它作为治疗的活菌制剂可使阴道内的菌群重建，并可改变厌氧菌和需氧菌的比例，改善阴道菌群失调的状态，使在短期内即可见到明显的效果，且无药物的副作用，既能防病治病，又具有一定的保健作用。袁宝伟等[13]应用乳杆菌活菌胶囊制剂(定菌生)，每晚睡前一粒胶囊放入阴道深部，10 d为一疗程,治愈率高达96.7%，且无明显不良反应。
参考文献
[1] 罗招凡,王惠英,丁红,李红玉.革兰染色法诊断细菌性阴道病.临床检验杂志,2004, 22(3):212.
, 百拇医药
[2] Nugent R P， Krohn M A，Hillier S L. Reliability of diagnosing bacterial vaginosis is improved by a standardized method of Gram stain interpretation. J Clin Microbiol，1991，29(2):297 301.
[3] 夏曙华,杨正安,吴延先.妇科门诊细菌阴道病的调查.贵阳医学院学报,2000,25(1):34 35.
[4] 姚娟,李东林,苏明权.加德纳菌实验诊断方法的评价和临床意义.陕西医学检验,2001,16(3):51 52.
[5] 谭巨莲.阴道加德纳菌的分离和鉴定.中华医学检验杂志,1991,14(2):107.
[6] 庄文越,王冰梅,孙红霞.阴道加特纳菌抗体检测的临床应用. 北华大学学报(自然科学版),2004,5(5):450 451.
, http://www.100md.com
[7] 张卓然.临床微生物学和微生物检验.人民卫生出版社,2003:204.
[8] 陈汝光,朱美玲,黄呈辉.阴道加德纳菌致病株的基因诊断方法.中化医学检验杂志,1999,22(3):168 169.
[9] Hillier S L. Diagonsis microbiology of bacterial vaginostic. Am J Obstet Gynecol，1993，169:455 459.
[10] 马玉楠.细菌性阴道病及其诊断.中华检验医学杂志,2000， 23(5):303 3041.
[11] 沈涌海,倪爱青,唐文芳.BV三项联合检测法对细菌性阴道病的诊断评价.中国卫生检验杂志,2007,17(11):2120.
[12] 夏红,樊伯珍,张弋.阴道加德纳菌的分离与快速细菌性阴道病的检测方法比较.同济大学学报,2004,25(1):22 23.
[13] 袁宝伟,王建文,孙立梅.乳杆菌活菌制剂治疗细菌性阴道病的疗效观察.中国微生态学杂志, 2001, 13(4):202., http://www.100md.com(欧陵斌)
1 Amsel 法
目前检测BV 的“金标准”，有四项指标：①均匀一致的稀薄白带，常附于阴道壁；②阴道pH 值>4.5；③阴道分泌物加入10%氢氧化钾出现胺味(即胺试验阳性)；④阴道分泌物镜检可见线索细胞。凡同时具备第4项及前3项中任意两项，即可诊断BV感染。尽管这种标准被广泛运用于BV的诊断，但易受人为因素与BV感染无关因素(如近期性交，滴虫感染，阴道灌洗，处于月经期或绝经后)等诸多因素的影响，主观性强，因而很难对其判定结果进行比校。
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2 细菌性阴道病病原菌检测
阴道加德纳菌(GV)是BV主要病原菌之一，目前主要的实验室诊断有：
2.1 革兰染色法[1]，革兰染色油镜下查找线索细胞,可见大量的GV附着在阴道上皮细胞上。Nugent等[2]提出的革兰染色细菌评分法是对BV 诊断的创新,他在镜下选出了3 种形态的菌群给出积分以诊断BV。此方法可在实验室内独立完成,并且能对阴道分泌物细菌进行鉴定和半定量检测,但缺点是对于中间态的标本不能确诊。革兰染色找加德纳菌和线索细胞,易于重复、便于保存,而且可以同时进行霉菌、淋球菌等的检测，但受到检验人员人为因素的制约。而且使用不同革兰染色试剂及操作方法可造成，判断为BV阳性的GV检出率差异显著[3，4]。
2.2 分离培养法 将阴道分泌物标本划种于GV分离培养基[5]，放厌氧培养箱于37℃微氧环境培养48 h。根据菌体，菌落及生化反应定种。鉴于BV患者GV培养阳性率低的状况,如果没有其他检验方法辅助信息的支持,容易造成误导。
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2.3 阴道加德纳菌抗体检测 采用酶标葡萄球菌A 蛋白(HRP SPA)检测细菌性阴道病患者血清中阴道加特纳菌抗体[6]。文章以HRP SPA用于ELISA技术中,代替第二抗体[7],检测患者血清中的GV抗体，解决了GV分离培养困难的问题,具有快速简便、试验稳定等优点。
2.4 聚合酶链反应技术 据陈汝光等报道[8]取宫颈分泌物，用PCR法测GV， BV阳性患者的检出率为25.5%，BV阴性妇女的检出率为4.6%。该法适用于反复发作，诊断前曾用过抗生素的病例。
3 微生物酶快速检测法
3.1 脯氨酸氨基肽酶(PIP)测定 PIP 是由阴道加德纳菌和动弯杆菌产生，是BV 相关病原体所分泌的特异性标志酶，故阴道分泌物中存在PIP 活性即可诊断BV[9]。
3.2 唾液酸酶测定 唾液酸酶法又称BLUE检测，它的实验原理是:BV蓝中主要含有细菌唾液酸酶专性可生色底物IBX 4041。当此溶液和细菌唾液酸酶接触时，会发生化学反应，产生唾液酸和IBX 4050， 加上一或两滴显色剂， 变成兰色，当细菌唾液酸酶缺乏时， 则不发生化学反应，溶液为黄色。国内、外均有研究报道BV 妇女阴道分泌物中唾液酸酶含量明显高于正常妇女，其唾液酸酶的活性甚至可以达到40 多倍[10]。
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3.3 BV三项联合检测法 它包括过氧化氢H202(阴道乳酸杆菌的标志物)、唾液酸苷酶Nacase(加德纳细菌、游动弯曲杆菌等BV致病菌的标志物)、白细胞酯酶LE(炎性细胞的标志物)三项指标[11]。BV三项联合检测是针对细菌性阴道病(BV)发生过程中的产H202乳酸杆菌减少，粒细胞被细菌毒素分解释放出白细胞酯酶，和致病的厌氧菌如加德纳细菌等的大量增殖、定居的过程来联合检测细菌性阴道病。
4 生化法
BV fast方法是根据检测阴道分泌物胺和pH原理制成，夏红[12]等报道临床上分离培养、BV fast、BV blue均可诊断细菌性阴道病，但BV fast更简便。
5 BV的治疗
目前，BV的治疗主要是选用抗厌氧菌药物，包括甲硝唑类药物及克林霉素等。BV的发生与阴道微生态失衡有关，因此近来提出用调整阴道内菌群的制剂来治疗BV，借以调整并保挣阴道微生态平衡，这样不但治愈BV而且可以防止其复发。
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首选甲硝唑500 mg，2次/d，共7 d；或200 mg，3次/d，共7 d；或2 g顿服，但少数患者出现胃肠道反应而不能耐受。口服替硝唑500 mg，2次/d，共6 d，其疗效与甲硝唑类似，副反应小。上述两种药物具有较强的抗厌氧菌作用,同时甲硝唑无抗乳杆菌作用,有助于阴道正常菌群的重建,故为治疗BV的首选药物。
微生态疗法是用从健康妇女阴道内分离出乳杆菌做主要成分制成微生态活菌制剂。它作为治疗的活菌制剂可使阴道内的菌群重建，并可改变厌氧菌和需氧菌的比例，改善阴道菌群失调的状态，使在短期内即可见到明显的效果，且无药物的副作用，既能防病治病，又具有一定的保健作用。袁宝伟等[13]应用乳杆菌活菌胶囊制剂(定菌生)，每晚睡前一粒胶囊放入阴道深部，10 d为一疗程,治愈率高达96.7%，且无明显不良反应。
参考文献
[1] 罗招凡,王惠英,丁红,李红玉.革兰染色法诊断细菌性阴道病.临床检验杂志,2004, 22(3):212.
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[11] 沈涌海,倪爱青,唐文芳.BV三项联合检测法对细菌性阴道病的诊断评价.中国卫生检验杂志,2007,17(11):2120.
[12] 夏红,樊伯珍,张弋.阴道加德纳菌的分离与快速细菌性阴道病的检测方法比较.同济大学学报,2004,25(1):22 23.
[13] 袁宝伟,王建文,孙立梅.乳杆菌活菌制剂治疗细菌性阴道病的疗效观察.中国微生态学杂志, 2001, 13(4):202., http://www.100md.com(欧陵斌)