不同条件保存羊膜移植治疗翼状胬肉的临床观察
【摘要】 目的 探讨不同条件保存羊膜移植治疗翼状胬肉的效果。方法 应用新鲜羊膜、纯甘油保存羊膜和深低温保存羊膜移植随机治疗翼状胬肉89眼。结果 3种方法保存的羊膜治疗翼状胬肉成功率相似。结论 3种方法保存的羊膜均可有效的防止翼状胬肉复发。
【关键词】
羊膜移植;翼状胬肉；制务和保存
羊膜移植治疗翼状胬肉使胬肉的复发率大大降低，已成为治疗翼状胬肉的首选方法之一。因羊膜的保存方法多种，本文观察了常用的3种保存方法下羊膜移植治疗翼状胬肉的效果。
1 资料与方法
1.1 一般资料 从2000年1月至2003年3月共选择病例78例89眼，男35例42眼，女43例47眼，年龄35~67岁，平均53.7岁。所有病例随机分成3组，A组11例(12眼)，B组49例(56眼)，C组18例(21眼)。所有病例术前均抗生素眼水滴眼。
, 百拇医药
1.2 羊膜的制备和保存 羊膜取自剖宫产的胎盘，术前已排除乙肝、丙肝、梅毒和HIV病毒阳性，取材在无菌条件下进行，钝性剥离羊膜，用生理盐水冲洗干净羊膜，含抗生素的生理盐水浸泡15 min。取出后剪成约3 mm×3 cm,用不同方法保存。A组 把羊膜湿房下，在4℃冰箱中保存，12 h内使用，又称新鲜羊膜[1]。B组 把羊膜放于纯甘油中，24 h再把羊膜取出放于另一纯甘油中，冰箱保存，2个月内使用。C组 把羊膜放在有DMEM：纯甘油按1∶1配制的保存液中，-80℃低温保存，1年内使用。保存羊膜在移植前均复水或复温-复水。
1.3 手术方法 局麻后在显微镜下行常规胬肉切除术，去除增生组织，暴露巩膜约4 mm×5 mm,彻底止血,把大小相等的羊膜上皮面向上覆盖在巩膜上,用10~0尼龙缝线缝合结膜和羊膜并固定在浅层巩膜上。
1.4 术后治疗 术后第2天换药，检查羊膜及术区无明显异常，给予妥布霉素地塞米松眼水滴眼，4次/d，2~3周拆线。
, 百拇医药
2 结果
89眼羊膜移植恢复好，羊膜光滑、平整无溶解。追踪观察最短的3个月，最长的已2年，3眼复发，其中A组1眼，B组2眼，均继续眼水滴眼，未再手术。
3 讨论
翼状胬肉是结膜下组织在紫外线、外伤或炎症等因素作用下，增殖并向角膜生长形成。近年来发现它的发生与角膜缘干细胞缺乏或功能障碍有关。它的治疗关键是复发问题，而羊膜的应用得到了满意的效果。
羊膜移植是利用同种异体组织治疗疾病的方法。羊膜来源于胎盘组织，含有人体最厚的基底膜。它是无血管和淋巴管的半透明组织，有一定韧性，无免疫原性。自20世纪90年代应用于治疗眼表疾病特别是翼状胬肉以来，使翼状胬肉从单纯手术切除的复发率24%~89%下降到3.8%~10.9%[2]。它的生理作用是羊膜基底膜可促进结膜干细胞分化为结膜上皮细胞，促进结膜上皮向角膜样上皮转化，促进角膜缘干细胞增殖，促进角膜上皮细胞的移行，抑制结膜下纤维组织增生，抑制新生血管增生，减少瘢痕的形成。羊膜中含有多种生长因子，羊膜具有抗炎、抗菌作用[3]。这些作用保证了良好的手术效果。
, 百拇医药
新鲜羊膜带有完整的上皮，和更多的活性因子，因此在羊膜移植术后早期可以直接为术眼提供连续完整的表面，避免了基底膜的暴露，相对保存羊膜提供给术眼的组织支架，具有明显的优势[4]。但新鲜羊膜中若带有与之黏附在一起的绒毛膜及产妇血清、病原微生物等抗原物，可引起不必要的排斥反应而造成手术失败[5]。同时新鲜羊膜也不能满足临床的随时需要。经过深低温保存和甘油无水处理的羊膜主要利用的是基底膜。基底膜可以利于上皮细胞移行，加强底层上皮细胞的粘附，促进上皮细胞分化，并且能阻止上皮细胞的凋亡。羊膜作为桥梁，促进周边健康的上皮细胞移行增生，并最终成为正常眼表的一部分。保存羊膜在移植后需要受体的健康结、角膜组织提供新生上皮的来源。保存羊膜无羊膜细胞，不表达HLA抗原，术后不会发生免疫排斥反应。深低温保存的羊膜与新鲜羊膜类似，活性羊膜生长因子含量高，能随时满足临床需要[6]，但对保存的技术和条件要求高，一般单位难以做到。
虽然3种保存方法的羊膜移植成功率相似，但新鲜羊膜因其时间性限制了它的应用。纯甘油保存羊膜缺乏上皮细胞，恢复时间长。深低温保存羊膜具有纯甘油保存羊膜和新鲜羊膜的优点，但其保存复杂，费用昂贵，限制了它的使用，随着研究的深入，会有一种保存方法更简单方便和有效。
, http://www.100md.com
参 考 文 献
[1] 全雄，梁海明.新鲜羊膜移植在角膜溃疡的临床应用.眼科新进展，2002，22(2)：131-132.
[2] 王敏华，龚向明.胬肉的治疗方法.中国实用眼科杂志，2002，20(12)：891-893.
[3] 候光辉，徐锦堂.羊膜的研究进展及其在眼科的应用.中国实用眼科杂志，1999,17(12)：646-650.
[4] 卢蓉，刘金陵，黄丹平,等.新鲜和深低温保存人羊膜重建兔眼结膜的研究.中国眼耳鼻喉科杂志，2002，2(1)：78-80.
[5] 余青，黄琼球，甄玉贤,等.儿童眼表化学伤中新鲜羊膜移植术的应用.眼科新进展，2002，22(2)：130.
[6] 刘绍辉，王传富，赵桂秋,等.羊膜保存方法及其对羊膜活性影响的研究.中国实用眼科杂志，2002,20(12)：812-817., 百拇医药(杨志强)
【关键词】
羊膜移植;翼状胬肉；制务和保存
羊膜移植治疗翼状胬肉使胬肉的复发率大大降低，已成为治疗翼状胬肉的首选方法之一。因羊膜的保存方法多种，本文观察了常用的3种保存方法下羊膜移植治疗翼状胬肉的效果。
1 资料与方法
1.1 一般资料 从2000年1月至2003年3月共选择病例78例89眼，男35例42眼，女43例47眼，年龄35~67岁，平均53.7岁。所有病例随机分成3组，A组11例(12眼)，B组49例(56眼)，C组18例(21眼)。所有病例术前均抗生素眼水滴眼。
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1.2 羊膜的制备和保存 羊膜取自剖宫产的胎盘，术前已排除乙肝、丙肝、梅毒和HIV病毒阳性，取材在无菌条件下进行，钝性剥离羊膜，用生理盐水冲洗干净羊膜，含抗生素的生理盐水浸泡15 min。取出后剪成约3 mm×3 cm,用不同方法保存。A组 把羊膜湿房下，在4℃冰箱中保存，12 h内使用，又称新鲜羊膜[1]。B组 把羊膜放于纯甘油中，24 h再把羊膜取出放于另一纯甘油中，冰箱保存，2个月内使用。C组 把羊膜放在有DMEM：纯甘油按1∶1配制的保存液中，-80℃低温保存，1年内使用。保存羊膜在移植前均复水或复温-复水。
1.3 手术方法 局麻后在显微镜下行常规胬肉切除术，去除增生组织，暴露巩膜约4 mm×5 mm,彻底止血,把大小相等的羊膜上皮面向上覆盖在巩膜上,用10~0尼龙缝线缝合结膜和羊膜并固定在浅层巩膜上。
1.4 术后治疗 术后第2天换药，检查羊膜及术区无明显异常，给予妥布霉素地塞米松眼水滴眼，4次/d，2~3周拆线。
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2 结果
89眼羊膜移植恢复好，羊膜光滑、平整无溶解。追踪观察最短的3个月，最长的已2年，3眼复发，其中A组1眼，B组2眼，均继续眼水滴眼，未再手术。
3 讨论
翼状胬肉是结膜下组织在紫外线、外伤或炎症等因素作用下，增殖并向角膜生长形成。近年来发现它的发生与角膜缘干细胞缺乏或功能障碍有关。它的治疗关键是复发问题，而羊膜的应用得到了满意的效果。
羊膜移植是利用同种异体组织治疗疾病的方法。羊膜来源于胎盘组织，含有人体最厚的基底膜。它是无血管和淋巴管的半透明组织，有一定韧性，无免疫原性。自20世纪90年代应用于治疗眼表疾病特别是翼状胬肉以来，使翼状胬肉从单纯手术切除的复发率24%~89%下降到3.8%~10.9%[2]。它的生理作用是羊膜基底膜可促进结膜干细胞分化为结膜上皮细胞，促进结膜上皮向角膜样上皮转化，促进角膜缘干细胞增殖，促进角膜上皮细胞的移行，抑制结膜下纤维组织增生，抑制新生血管增生，减少瘢痕的形成。羊膜中含有多种生长因子，羊膜具有抗炎、抗菌作用[3]。这些作用保证了良好的手术效果。
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新鲜羊膜带有完整的上皮，和更多的活性因子，因此在羊膜移植术后早期可以直接为术眼提供连续完整的表面，避免了基底膜的暴露，相对保存羊膜提供给术眼的组织支架，具有明显的优势[4]。但新鲜羊膜中若带有与之黏附在一起的绒毛膜及产妇血清、病原微生物等抗原物，可引起不必要的排斥反应而造成手术失败[5]。同时新鲜羊膜也不能满足临床的随时需要。经过深低温保存和甘油无水处理的羊膜主要利用的是基底膜。基底膜可以利于上皮细胞移行，加强底层上皮细胞的粘附，促进上皮细胞分化，并且能阻止上皮细胞的凋亡。羊膜作为桥梁，促进周边健康的上皮细胞移行增生，并最终成为正常眼表的一部分。保存羊膜在移植后需要受体的健康结、角膜组织提供新生上皮的来源。保存羊膜无羊膜细胞，不表达HLA抗原，术后不会发生免疫排斥反应。深低温保存的羊膜与新鲜羊膜类似，活性羊膜生长因子含量高，能随时满足临床需要[6]，但对保存的技术和条件要求高，一般单位难以做到。
虽然3种保存方法的羊膜移植成功率相似，但新鲜羊膜因其时间性限制了它的应用。纯甘油保存羊膜缺乏上皮细胞，恢复时间长。深低温保存羊膜具有纯甘油保存羊膜和新鲜羊膜的优点，但其保存复杂，费用昂贵，限制了它的使用，随着研究的深入，会有一种保存方法更简单方便和有效。
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参 考 文 献
[1] 全雄，梁海明.新鲜羊膜移植在角膜溃疡的临床应用.眼科新进展，2002，22(2)：131-132.
[2] 王敏华，龚向明.胬肉的治疗方法.中国实用眼科杂志，2002，20(12)：891-893.
[3] 候光辉，徐锦堂.羊膜的研究进展及其在眼科的应用.中国实用眼科杂志，1999,17(12)：646-650.
[4] 卢蓉，刘金陵，黄丹平,等.新鲜和深低温保存人羊膜重建兔眼结膜的研究.中国眼耳鼻喉科杂志，2002，2(1)：78-80.
[5] 余青，黄琼球，甄玉贤,等.儿童眼表化学伤中新鲜羊膜移植术的应用.眼科新进展，2002，22(2)：130.
[6] 刘绍辉，王传富，赵桂秋,等.羊膜保存方法及其对羊膜活性影响的研究.中国实用眼科杂志，2002,20(12)：812-817., 百拇医药(杨志强)