输血前不规则抗体筛查结果分析
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【关键词】 血清；不规则抗体；溶血性输血反应
根据我国《临床输血技术规范》的要求对输血史或妊娠史的患者进行不规则抗体筛选，该项阳性的患者一旦输入具有相应抗原的红细胞，抗原、抗体就会发生免疫性结合，在补体的参与下，输入的红细胞发生溶解，即发生急性溶血性输血反应或者发生迟发性溶血性输血反应。急性溶血性输血反应患者出现发热、贫血、黄疸和血红蛋白尿，严重时甚至危及其生命。因此，在输血中要警惕这种输血反应发生的可能性。当不规则抗体筛选阳性时，必须进一步作抗体鉴定，确定其特异性后，再输入无相应抗原的红细胞或交叉配血相合的红细胞，才能达到安全输血的目的。因此，进行不规则抗体筛查非常重要。本文对我院2010年到2011年的配血标本进行不规则抗体筛查和抗体鉴定，现将鉴定结果报道如下：
1 材料与方法
1.1 材料 检测标本均为对2010年到2011年本院住院患者需要输血的患者血标本。微柱凝胶卡由Diana公司提供；筛选细胞、谱细胞、红细胞血型定型免疫试剂由上海生物医药制品有限公司提供；单克隆血型抗体试剂均为国外原装进口。
1.2 仪器 血清学专用离心机(KA-2200)，普通离心机80-2(上海手术器械厂)，HZS-M水浴振荡仪(哈尔滨东联电子技术有限公司)，水浴恒温箱(上海医用恒温设备厂)，OLMPUS显微镜(日本)及Diana微柱凝胶专用设备。
1.3 微柱凝集法，向标示好Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的3个微柱反应池中加40 μl备检血清，再加10 μl 5%相应筛检红细胞；每孔加1滴BLISS液，置37℃孵育10 min；取出置专用水平离心机离心5 min，观察结果：红细胞全部沉于微柱底部者为阴性，聚于微柱上面者为阳性(将阳性血清再用间接抗球蛋白试验确证)。如抗体筛选阳性需进一步进行抗体鉴定，操作方法与上相同。自身抗体阳性的标本采用微柱凝胶自身抗体分型卡进行抗体分型，操作方法同上。
1.4 抗球蛋白试验(试管法) 取5支标识好Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、阳性对照、阴性对照的试管，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ管加5%相应筛检红细胞2滴和被检血清2滴，阳性对照管加5%Rh(D)阳性红细胞和IgG抗-D血清各2滴，阴性对照管加5%Rh(D)阳性红细胞和AB型血清各2滴；各管37℃孵育1 h后用生理盐水洗涤3次，再加抗球蛋白试剂2滴，2000r/min离心1 min，观察结果：当阳性对照管和被检管出现凝集，而阴性对照管不凝集时，即为阳性，说明血清中有不规则抗体存在。需进一步进行抗体鉴定，操作方法与上相同。
2 结果
不规则抗体检测结果见表1。从表1中可见，不规则抗体阳性32例，其中同种抗体18例(56.25%)，自身抗体14例(43.75%)，同种抗体中以Rh血型系统最为常见，伴混合抗体的比率为30%(3/10)；抗体类型多为IgG型抗体，与IgM型的比率为12∶7。自身抗体中冷自身抗体4例，抗体类型为IgM型；温自身抗体10例，单纯抗IgG抗体阳性2例，抗IgG、C3 d抗体同时阳性8例，抗体类型均为IgG型。对有同种抗体的患者输入无相应抗原的红细胞后，患者未发生溶血性输血反应。有自身抗体的患者按自身溶血性贫血的输血原则输注洗涤红细胞，首次不超过1 U单位，采用少量多次缓慢输入后，患者贫血症状缓解。
3 讨论
不规则抗体的筛查已广泛应用于输血反应的诊断与预防，特别是对有妊娠史和输血史的患者。虽然不规则抗体在正常人群中检出率仅为 0.3%~2%[1]，但它是引起迟发性免疫反应的主要原因。由于Rh血型系统抗原性较强，产生免疫性抗体的频率较高，据报道每输一个单位血使受血者致敏的风险为1%~1.6%，多次输血产生同种抗体的几率为15%~20%，对于连续输血患者，3 d筛检1次，或5~6 d筛检1次[2,3]，以防止开始效价很低不易检出，但经过输血刺激，回忆性抗体效价迅速升高而引起溶血反应。因此，输血前进行常规抗体筛选，以发现有临床意义的不规则抗体，对临床输血安全具有重要的意义。
不规则抗体是指抗-A、抗-B以外的血型抗体，主要经输血或妊娠等免疫刺激产生，常分为自身抗体和同种抗体，同种抗体一般具有特异性，自身抗体是非特异性的。不规则抗体类型有IgM，也有IgG型。近年来发展起来的微柱凝胶技术对这两种类型的抗体都有很好的检测效果，这种技术在国外输血界已成为常规检测方法[4,5]，我们在输血前应用凝胶柱技术对患者标本进行不规则抗体筛查，与手工抗球蛋白法检测的结果完全一致，可以准确地检出患者体内的不规则抗体。本次调查结果显示输血前患者血清中的同种抗体的主要是Rh 系统抗体，而临床上发生迟发性溶血反应的也绝大部分是由 Rh 血型抗体引起的，其中以抗-E最多，也有报道抗-D大于抗-E[6]。台湾的调查资料认为抗-D抗体在台湾人中较为罕见，仅为1/235000，这与本次调查结果也不一致，可能与调查对象的选择有关。理论上的解释为D的抗原性强于E，但是黄种人D阴性频率约3/1000，而E抗原阴性率为61%，因此，我们认为抗-D产生频率应小于抗-E。MNSs系统抗体一般为冷反应性抗体，有学者认为其是无临床意义的抗体，但若在37℃有反应性时，还会引起临床急性输血反应，应引起临床的足够重视。 对于同种抗体的输血治疗，原则上是然后根据抗体性质提前寻找相合的血液或采用其他方式输血。在筛出不规则抗体后及时与血站联系，以提前准备相合血液，或采取自身输血，为患者提前储血。对含有自身抗体的自身溶贫患者，抗体筛选也可以出现假阳性结果，但患者自身红细胞也有凝集，应该进行自身抗体分型，选择与受血者Rh 系统血型完全一致者进行输血。IgM型抗体一般在37℃有活性，一般在体内不能引起溶血反应，但患者处于低温麻醉状态下手术时应注意，因为此类抗体可激活补体途径导致溶血反应。因此输血时也要注意加温输注。
因此，对于需要输血的患者进行抗体筛选，可以及早发现不规则抗体，从而提前准备相合的血液，以保证体内有不规则抗体的患者及时用血，避免由血型不合引起的输血反应。
参 考 文 献
[1] 肖星莆.输血技术手册.四川科学技术出版社，1992:95.
[2] 胡永红，李勇.抗体检测和鉴定.见：李勇，杨贵贞主编.人类红细胞血型学实用理论与实验技术.中国科学技术出版社,1999:139-157.
[3] 孔令宜. 红细胞检查.见：孔令宜，马三科，马长仁，等编著.成份输血与临床应用. 辽宁科技出版社，1994:369-429 ......
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