HPLC柱切换法比较轻度烧伤感染与中度烧伤感染患者头孢吡肟的血药浓度(2)
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2.6 标准曲线线性关系 分别取标准曲线样品2 ml，按2.2项下处理，进样25 μl，经采集数据、建立头孢吡肟光谱库、优化积分参数，按头孢吡肟的浓度为横坐标、头孢吡肟与头孢曲松的峰面积比为纵坐标绘制标准曲线。在血浆中头孢吡肟在0.5~200 μg/ml的线性范围内得到线性关系良好的曲线方程：y=0.0347X+0.0059(r=0.9995)。
2.7 精密度试验及相对回收率试验 用空血浆配制头孢吡肟0.5，10，200 μg/ml三个浓度的血样，按“2.2”项下处理，进样，经2010系统工作站，按内标峰面积标准曲线法自动求得样品含量，计算相对回收率，结果头孢吡肟浓度为0.5 μg/ml的平均回收率(92.91±6.71)%，RSD：7.22%；10 μg/ml的平均回收率(95.13±4.85)%，RSD=5.09%；200 μg/ml 的平均回收率(94.83±4.56)%，RSD=4.81%。
3 结果
3.1 日间差、日内差 用空血浆配制头孢吡肟0.5，10，200 μg/ml三个浓度的血样，按“2.2”项下处理，进样，经2010系统工作站，计算头孢吡肟与头孢曲松的峰面积比。日内差(间隔1 h，n=5)与日间差(间隔24 h，n=6)，结果见表2。
由表2可知日内差、日间差的相对标准差均小于10%，表明实验方法相对稳定。
3.2 轻度烧伤组和中度烧伤组的头孢吡肟的血药浓度 将轻度烧伤感染组和中度烧伤感染组的血浆样品按2.2项下处理，进样，经2010系统工作站，按内标峰面积标准曲线法自动求得样品含量，头孢吡肟的血药浓度见表3。
头孢吡肟在轻度烧伤组和中度烧伤组的血药浓度按成组比较，经SPSS 8.0统计学软件处理，两组差异有统计学意义(P<0.05)。提示：中度烧伤患者头孢吡肟的代谢或消除大于轻度烧伤感染，故应适当缩短中度烧伤感染患者的头孢吡肟的滴注的间隔时间或增大其用药剂量。
4 讨论
4.1 从表2结果可知，中度烧伤组的头孢吡肟血药浓度显著低于轻度烧伤组(P<0.05)，这可能与中度烧伤患者的药物蛋白结合率有关[3]。
4.2 本文提示缩短中度烧伤感染患者的头孢吡肟的滴注的间隔时间或增大其用药剂量结论，主要是因为中度烧伤的药血浓度因烧伤的因素增加了药物的代谢，故需了通过调整用药剂量或增加用药频次的给药方案提高该类患者的血药浓度。
4.3 本实验在测量样品时采用了简易的离心生物样品处理法，该步骤有赖于柱切换液相色谱法的特点，回避了单纯HPLC法因蛋白质与流动相中的有机溶剂发生反应、导致沉淀，堵塞色谱柱，故不能直接进样的缺点[4]。
4.4 HPLC柱切换法的原理是：样品中的蛋白质及其他内源杂质受亲水性外表面的作用和孔径大小的限制，被预处理流动相直接洗脱出来，而样品中的被测物在洗脱至分析柱之前被吸附在填料间隙中，得以净化和富集，然后切换至并分析柱相连接，用分析流动相将被测物从预柱洗脱出至分析柱，进行分离测量。从而提高了分离和检测效率。
参 考 文 献
[1] Loirat P J，Rohan A. Baillet F，et al.Increased glomerular filtration rate in patients with major burns and its effect on the pharmacokinetics of tobramycin N Engl J Med,1978,299:915-919 ......
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