苏木素在真菌性角膜炎诊断中的应用(2)
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图1
涂片查找真菌(100，A：KOH湿片法，B：苏木素染色法)
3 讨论
真菌性角膜炎是严重的致盲眼病，早期诊断、早期治疗对视力预后有决定性的影响。真菌性角膜炎的确诊需依靠实验室检查[4]。本研究发现苏木素染色法查找真菌的灵敏度、特异度、阳性率、正确指数、阳性预测值、阴性预测值均高于KOH湿片法；苏木素染色法查找真菌的假阳性率、假阴性率均低于KOH湿片法。诊断试验的真实性包括灵敏度和特异度。灵敏度即真阳性率，指的是诊断试验能将实际患病的病例正确地判断为患病的能力。特异度即真阴性率，是指诊断试验能将实际未患某病的病例正确地判断为未患病的能力。正确指数(约登指数)＝灵敏度+特异度-1。灵敏度、特异度越高，诊断试验的正确指数愈高，则该试验的真实性愈高。本研究发现苏木素染色法查找真菌的灵敏度、特异度和正确指数均高于KOH湿片法查找真菌，这说明苏木素染色法查找真菌的真实性更高。阳性预测值是指诊断试验阳性的病例中真阳性的比例；阴性预测值是指试验阴性的病例中真阴性的比例。研究人群患病率水平对诊断试验阳性预测值的影响却很大。本研究人群为临床诊断真菌性角膜炎病例，这属高危人群，诊断试验的阳性预测值较高。本研究发现苏木素染色法查找真菌的阳性预测值高于KOH湿片法查找真菌，达92.11%。这说明苏木素染色法查找真菌阳性的病例患真菌性角膜炎的可能性很大，这可用于指导临床早期治疗。假阳性率指诊断试验将实际未患病的病例错误判断为患病的能力，即为误诊率。假阴性率是指诊断试验将实际患病的病例错误判断为无病的能力，即为漏诊率。本研究发现苏木素染色法查找真菌的假阳性率、假阴性率均低于KOH湿片法查找真菌。这说明苏木素染色法查找真菌的误诊率和漏诊率均较低。
苏木素是临床病理最常用的染色剂之一，价格便宜，易于获得。苏木素是从洋苏木中提取的一种染色剂，能够在使细胞核染色。苏木素为紫色液体，可将菌丝、孢子染色紫色，增强与背景的对比度，使菌丝和孢子易于被检出，从而提高了诊断试验的灵敏度、阳性率、阳性预测值；且染色后的菌丝与角膜纤维、杂质易于区分，提高了诊断试验的特异生、阴性预测值。
影响真菌涂片检出率的因素。①苏木素染液苏木素染液久置后会产生沉淀，过滤后染色，这可减少由于染液沉淀造成假阳性的出现，减低误诊率。②标本采集当刮片中真菌数量少时,苏木素染色检出率就下降[4-5]。由于真菌生长多位于溃疡周边部及底部,但溃疡中央的白色粘性物质往往是菌丝丛，角膜标本少，采集的标本时连溃疡中央的白色粘性物质一起采聚后直接涂片可提高真菌涂片的检出率。③涂片过厚涂片过厚时，标本重叠不利于镜下观察判断，涂片标本应在染色液中尽量分散开，必要时在盖玻片上加压促进团块状物质分散。
随着角膜接触镜的普及以及广谱抗生素、激素、免疫抑制剂的广泛使用，真菌性角膜炎的发病率不断增高。真菌性角膜炎早期、快速、有效的诊断方法是目前研究的热点[1, 2, 4]。激光共焦显微镜和PCR技术在真菌性角膜炎诊断领域中展示了良好的应用前景,但其价格昂贵，目前还不能普及应用[6-8]，且有许多问题有待进一步研究。苏木素染色法价格便宜，查找真菌几分钟便可出结果，灵敏度高，阳性预测值高，是真菌性角膜炎早期诊断简单、快速、有效的方法。
参 考 文 献
[1] Jurkunas U, Behlau I, Colby K. Fungal keratitis: changing pathogens and risk factors.Cornea,2009,28(6):638-643.
[2] 王丽娅.我国真菌性角膜炎的研究现状.眼科,2005,14(3):143-144.
[3] Das S, Sharma S, Kar S, et al. Is inclusion of Sabouraud dextrose agar essential for the laboratory diagnosis of fungal keratitis? Indian J Ophthalmol,2010,58(4):281-286.
[4] Nayak N. Fungal infections of the eye-laboratory diagnosis and treatment. Nepal Med Coll J,2008,10(1):48-63.
[5] Bashir G, Shah A, Thokar MA, et al ......
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