子宫内膜癌与正常子宫内膜组织中PR基因启动子区CpG岛甲基化的对比研究(1)
 |
| 第1页 |
参见附件(2208KB，2页)。
【摘要】 目的 研究子宫内膜癌中孕激素受体亚型PRA、PRB表达与其启动子区甲基化状态的关系, 探讨子宫内膜癌组织、细胞分子变化特征及孕激素受体亚型表达下调的机制。方法 ①应用免疫组化SP法检测子宫内膜癌组织中PRA、PRB蛋白的表达。②应用甲基化特异性PCR 检测子宫内膜癌组织及经5,杂氮脱氧胞苷(ADC)处理前后子宫内膜癌Hec,1,B细胞系中PRA、PRB的甲基化状态。③应用免疫印迹法检测ADC处理Hec,1,B细胞系前后PRA、PRB蛋白的表达。结果 ①与正常子宫内膜组织比较:PRA蛋白在高、中低分化子宫内膜癌组织中表达差异无统计学意义；PRB蛋白在高分化子宫内膜癌组织中表达无明显降低，差异无统计学意义，在中低分化子宫内膜癌组织中表达明显降低，差异有统计学意义。②与正常子宫内膜组织比较，子宫内膜癌组织中，PRA启动子区CpG岛甲基化率较低，差异无统计学意义，PRB启动子区CpG岛甲基化率较高，差异有统计学意义，与组织分化程度有关，与病理类型及有无淋巴结转移和有无肌层浸润无关。结论 子宫内膜癌组织以及Hec,1,B细胞系中，存在PR基因异常甲基化，ADC可通过去甲基化作用使PRB 恢复表达，可能提高子宫内膜癌的临床内分泌治疗效果。
【关键词】 子宫内膜癌；孕激素受体亚型；甲基化
Research express defect and CpG promotor region methylation of progesterone receptor gene in human uterine endometrial carcinoma TIAN Hai,xia.Department of Gynaecology and obstetrics,Centre People’s Hospital of Siping,Siping 136000,China
【Abstract】 Objective Study the relationship between PRA and PRB expression and promoter methylation status in the endometrial cancer, to explore the molecular characteristics and expression of progesterone receptor isoforms downward mechanism.Methods Application of immunohistochemical and methylation,specific PCR to detect PRA and PRB protein expression in the endometrial carcinoma tissues. Results ① Compared with normal endometrial tissues, PRA protein were not significantly reduce,PRB protein in well,differentiated endometrial carcinoma were not significantly lower, in poorly differentiated endometrial cancer tissues decreased. ② PRA promoter region CpG island methylation rate is not significant difference, PRB was relatively high, related with the degree of differentiation, unrelated with pathological type and lymph node metastasis and muscularis infiltrates. Conclusion Endometrial cancer tissues and cell lines, existence of abnormal methylation of PR gene, maybe involved in the formation of endometrial cancer.
【Key words】 Endometrial carcinoma; Progesterone receptor isoform;Methylation
子宫内膜癌(endometrial carcinoma)为女性生殖器三大恶性肿瘤之一，近年发病率有上升趋势[1]。子宫内膜癌的发生机制可分两类：雌激素依赖型和非雌激素依赖型。无论是雌激素依赖型还是非依赖型子宫内膜癌,其发生均与体内雌激素对子宫内膜作用紊乱相关。孕激素有对抗雌激素的作用，雌孕激素通过与其受体结合而产生生物学效应。子宫内膜癌肿瘤细胞发展到一定阶段会失去雌孕激素受体，而含量丰富者对内分泌治疗反应良好。PR基因编码两种同源性的蛋白质PRA和PRB[2]， PRA通过阻止ER的功能而直接对抗雌激素的作用；PRB主要参与调节子宫内膜增殖，在低分化的子宫内膜癌细胞系中常缺失。有研究[3]表明孕激素受体B亚型在子宫内膜癌中失表达，A亚型无失表达现象。启动子甲基化是基因表达沉默的重要机制[4]。去甲基化试剂可使表达沉默的基因重新恢复表达，说明甲基化可能为导致PRB失活的原因。本实验通过对PR亚型甲基化的深入研究，将有助于对子宫内膜癌发病机制提供新的认识，可为其预防、治疗以及预后的判断提供更可靠理论依据和试验支持。
1 资料与方法
1.1 一般资料 不同临床病理特征子宫内膜癌标本40例来自四平中心医院2000~2007年归档的石蜡块。30例正常子宫内膜来自同期因宫颈CIN Ⅲ手术切除子宫内膜之石蜡块标本。人子宫内膜癌细胞株，所有患者无雌孕激素使用史及放化疗史。
1.2 实验方法
1.2.1 免疫组化SP法检测PRA、PRB 蛋白在实验组及对照组的表达。
1.2.2 MSP检测子宫内膜癌组织PRA、PRB基因启动子区CPG岛甲基化发生率 ......
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(2208KB，2页)。