雷公藤诱导卵巢早衰大鼠模型醛固酮的变化研究
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【摘要】目的探讨醛固酮的变化与卵巢早衰的关系，探讨疾病的发病机制。方法本实验用雷公藤诱导早衰Wistar大鼠模型的肾上腺结构及醛固酮的变化作一研究。结果早衰大鼠的肾上腺球状带结构发生了明显的变化,球状带明显增厚。并且血清中醛固酮含量有所上生。结论说明可能醛固酮的升高与早衰的发生发展存在一定关系。
【关键词】卵巢早衰；醛固酮；雷公藤
Change of aldoslerone in prematureovarian failure (POF) model that by using LeigongtengZHANG Yan， ZHANG Ye， ZHOU Li-nan. Liaoning Unversity of Traditional Chinese Medicine,Shenyang 110101,China
【Abstract】ObjectiveThis issue is to find the relation between aldoslerone and prematureovarian failure (POF) model, explore the mechanism of disease.MethodsPOF models were established in Wistar rats by using Leigongteng and explore the change of adrenal and aldoslerone as a research. ResultsThe results indicate that the structure of adrenal had a notable change that ball belt notable thickened,and aldoslerone of blood serum increased.ConclusionIt shows some relationship between the prematureorarian failure and aldoslerone adrenal.
【Key words】Prematureovarian failure; Aldoslerone adrenal；Leigongteng
作者单位：110101辽宁中医药大学(张晔周郦楠)；辽宁卫生职业技术学院(张艳)
通讯作者：周郦楠卵巢早衰(POF)是卵巢功能提前减退，是指女性在40岁以前出现闭经，以闭经，不育，雌激素缺乏以及促性腺激素水平升高为特征的一种疾病[1，2]。在人群中发病率为1%~3%，在继发性闭经中占2%~10%，诊断以至少半年或半年以上闭经多次发生，排除其他原因为基础，卵巢早衰是妇科分泌领域的常见病[3]。卵巢早衰(POF)病因多种多样，具体发病机制尚不清楚，而且没有有效的治疗方法。本实验选择诱导卵巢早衰的药物为雷公藤多苷片，有多个研究表明，雷公藤可诱导卵巢早衰的发生与发展[4]。雷公藤的生理活性强,具有显著的抗炎、抗肿瘤、抑制生育及免疫调节等作用,目前已被广泛应用于肾炎、肿瘤、皮肤病、哮喘、系统性红斑狼疮、子宫内膜异位症等多种疾病的治疗,特别是在治疗类风湿性关节炎方面有显著的疗效。因此，为了寻找病因和有效的治疗方法，本文对雷公藤诱导的卵巢早衰大鼠模型的肾上腺球状带结构的变化作一观察研究。并观察了醛固酮的变化。
1资料与方法
1.1材料与方法
1.1.1药物雷公藤多苷片(生产厂家：上海复旦复华药业有限公司，片剂，0.5 mg/片)，实验时用生理盐水配成2 mg/ml浓度的溶液。醛固酮放射免疫试剂盒(购于北京北方免疫试剂研究所)。
1.1.2实验动物及方法体重230~300 g的雌性SD大鼠30只，正常饲养两周，随机分为A与B两组，每组15只，A组为对照组，胃饲相同剂量生理盐水9 d，1次/d。B组为模型组，按照0.6 mg/100 mg(体重)的剂量给药9 d，胃饲1次/d。给药完毕后24 h以内各组动物用1%戊巴比妥钠(40 mg/kg)腹腔麻醉后开胸，经左心室插管至升主动脉，剪开右心耳，用含1%肝素钠生理盐水500 ml快速冲洗后，继用0.1 m磷酸盐缓冲液(PBS,pH=7.4)配置的固定液(含4%多聚甲醛)灌流固定，取出实验动物肾上腺和卵巢，置于上述固定液中后固定2 h，移入20%蔗糖磷酸盐缓冲液，4℃过夜，组织块沉底，经水包埋，恒冷箱切片，片厚20 μm。
1.1.3HE染色步骤①苏木素染液6 min，流水冲洗30 s。②1%盐酸乙醇3 s反蓝，流水冲洗30 s。③依红染液3 min，流水冲洗30 s。④梯度酒精脱水，二甲苯透明。⑤封片保存。
1.2观察指标雌二醇(E2)含量的变化。严格按照试剂盒说明书进行检验。血清醛固酮含量的变化。严格按照试剂盒说明书进行检验。卵巢HE染色，观察卵巢形态的变化。肾上腺HE染色，观察球状带的变化。
1.3统计学方法本文采用SPSS 10.0进行统计学分析，采用t检验方法。
2结果
2.1卵巢HE染色结果可见模型组与对照组相比，大鼠卵巢萎缩，卵泡数目减少，卵泡闭锁增多，间质增生明显，卵巢间质纤维化，卵巢功能明显受损，表明造模成功。
2.2肾上腺HE染色结果经过冰冻切片，HE染色观察，肾上的球状带细胞发生明显的变化，可见肾上腺皮质球状带明显代偿性增厚，细胞变大迹象。
2.3对血清雌二醇及醛固酮含量变化的影响，见表1。
表1各组大鼠血清中雌二醇、醛固酮含量的比较(x±s)
组别E2(pg/ml)ALD(ng/L)对照组116.20±9.67252.30±31.85模型组67.26±5.85*542.09±41.15**注：雌二醇模型组与对照组差异:*P<0.05;醛固酮模型组与对照组比较差异：**P<0.01.
由数据可知，模型组与对照组比较，雌二醇有显著的下降，说明造模成功。
与对照组比较，模型组醛固酮的含量明显上升，并且有统计学意义。
3讨论
醛固酮是由肾上腺皮质球状带细胞合成和分泌的一种盐皮质素。主要作用于肾脏远曲小管和肾皮质集合管，增加对钠离子的重吸收和促进钾离子的排泄，从而保留水分的作用。它与下丘脑分泌的抗利尿激素相互协调，共同维持体内水和电解质的平衡。醛固酮的分泌，是通过肾素-血管紧张素系统实现的。当细胞外液容量下降时，刺激肾小球旁细胞分泌肾素 ......
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