HGF+EGF联合诱导大鼠BMSCs分化肝样细胞的研究
骨髓间充质干细胞,HGF+FGF,肝细胞
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袁丹妮 李洪秀 王鹏 辽宁医学院解剖学教研室;盘锦市第二人民医院骨科;盘锦市第二人民医院普外科;
【摘要】目的在成功分离并培养大鼠骨髓间充质干细胞的基础上,用HGF、EGF以及HGF+EGF诱导其向肝细胞方向分化,并采用不同方法鉴定细胞分化能力,试图为肝细胞移植等寻找新的种子细胞来源。方法应用HGF、EGF、HGF+EGF诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为肝样细胞。实验分组:A组:未加任何诱导因素的BMSCs;B组:HGF(20ng/ml),诱导分化BMSCs;C组:EGF(10ng/ml),诱导分化BMSCs;D组:HGF(20ng/ml)+EGF(10ng/ml),诱导分化BMSCs。相差显微镜下观察细胞形态的变化;在诱导第7、21天行免疫细胞化学染色检测肝细胞标志AFP和CK18。结果在加入各种诱导成分后,梭形或成纤维细胞样细胞随着诱导时间的延长,变成纺锤形、不规则圆形或多角形细胞,数量逐渐变多,形似肝细胞。在诱导分化第7天和21天免疫细胞化学染色各诱导组均可检测出AFP和CK18表达,图像分析表明HGF+EGF联合诱导分化的AFP、CK18阳性率最高,HGF次之,EGF则较弱。结论 HGF、EGF、HGF+EGF均能诱导大鼠骨髓间充质千细胞分化为肝样细胞,分化后的肝样细胞能分泌肝细胞特异性产物AFP、CK18。
【关键词】 骨髓间充质干细胞 HGF+FGF 诱导 肝细胞
【分类号】R329
BMSCs在体外环境下可以分化为肝细胞系。此外,MSCs存在于骨髓,具有供源丰富、易于获得、有自体供源、避免免疫排斥等优点。骨髓源的MSCs是较为理想的肝干细胞来源。本实验以HGF和EGF作为诱导分化剂,在体外诱导大鼠源性骨髓间充质干细胞向肝样细胞分化,并检测其分化率。试图为
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[摘要]目的 在成功分离并培养大鼠骨髓间充质干细胞的基础上，用HGF、EGF以及HGF+EGF诱导其向肝细胞方向分化，并采用不同方法鉴定细胞分化能力，试图为肝细胞移植等寻找新的种子细胞来源。方法 应用HGF、EGF、HGF+EGF诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为肝样细胞。实验分组:A组:未加任何诱导因素的BMSCs;B组:HGF(20 ng/ml)，诱导分化BMSCs；C组:EGF(10 ng/ml)，诱导分化BMSCs；D组:HGF(20 ng/ml)+EGF(10 ng/ml)，诱导分化BMSCs。相差显微镜下观察细胞形态的变化；在诱导第7、21天行免疫细胞化学染色检测肝细胞标志AFP和CK18。结果 在加入各种诱导成分后，梭形或成纤维细胞样细胞随着诱导时间的延长，变成纺锤形、不规则圆形或多角形细胞，数量逐渐变多，形似肝细胞。在诱导分化第7天和21天免疫细胞化学染色各诱导组均可检测出AFP和CK18表达，图像分析表明HGF+EGF联合诱导分化的AFP、CK18阳性率最高，HGF次之，EGF则较弱。结论 HGF、EGF、HGF+EGF均能诱导大鼠骨髓间充质千细胞分化为肝样细胞，分化后的肝样细胞能分泌肝细胞特异性产物AFP、CK18。
[关键词]骨髓间充质干细胞；HGF+FGF；诱导；肝细胞
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