快速成功建立兔腹主动脉狭窄的模型(2)
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参见附件。
1 材料和方法
1.1 设计 对比观察动物实验。
1.2 单位 郑州大学第一附属医院老年综合一科。
1.3 材料 实验于2003年2~5月在郑州大学人民医院心血管内科实验室完成。选择雄性4月龄新西兰大白兔10只，体质量2.5～3.5 kg，由河南省实验动物中心提供(合格证号：医动字第4102009号)。全价颗粒饲料由河南省实验动物中心提供，含1.5%胆固醇的高脂饮食饲料由河南省实验动物中心配制。主要仪器：普通球囊导管和附件：球囊(3.0～3.5)mm 15 mm(Cordis公司)，5F桡动脉鞘管和21 g桡动脉穿刺针(Cordis公司)，0.014〞mm 195 cm ATW 经皮冠状动脉腔内成形术引导钢丝(Cordis公司)，球囊扩张压力泵(Cordis公司)。检测仪器：心导管造影机(美国GE公司LCplus)。试剂：胆固醇(上海生物化学试剂总公司)，优维显370[先灵(广州)药业有限公司]。
1.4 设计、实施、评估者 设计为第一作者，实施为全部作者，评估者为郑州大学第一附属医院心血管内科魏经汉、黄振文、李凌。评估者经过正规培训。
1.5 方法 动脉粥样硬化狭窄模型的建立[1]：选取20只健康新西兰雄性大白兔，分笼饲养，饲喂正常的全价颗粒饲料，自由饮水，观察1周后进入实验。随机分为单纯饲喂高脂饮食组、高脂饮食与动脉内膜剥脱组，每组10只。1周后所有的兔子均开始高脂饲料(含1.5%胆固醇)喂养，高脂饮食与动脉内膜剥脱组高脂喂养3 d后行内皮剥脱术。术后继续喂养同样的高脂饲料。
腹主动脉内皮剥脱术：以安定10 mg/只，氯胺酮100 mg/kg肌肉注射麻醉动物，并固定于兔专用实验手术台上。剪去左股动脉体毛，在左侧股动脉明显搏动处周围剃毛约直径5 cm。在无菌条件下，沿股动脉走行方向切开皮肤，分离皮下组织及肌肉，钝性分离左股动脉。局部注入10 g/L利多卡因2 ml，解除或防止痉挛。直视下以21 g桡动脉穿刺针行股动脉穿刺术。穿刺成功后，借助于导丝插入5F桡动脉鞘管。拔出导丝及扩张器，注入肝素200 U/kg。在经皮冠状动脉腔内成形术导丝引导下插入球囊导管达20 cm深，使球囊位于腹主动脉下段。通过压力泵向球囊内注入肝素生理盐水，维持压力0.6 kPa，并缓慢回拉球囊导管，回拉有阻力时表明球囊直径与血管吻合，如球囊较小，则换用大0.5 mm的球囊(3.0～3.5 mm)，压力泵压力归零，重复操作3次，剥脱腹主动脉内皮。退出球囊及导丝，拔出鞘管，分别结扎股动脉近远端。伤口处洒入庆大霉素8万U，防止感染。缝合手术切口。术后继续以肌肉注射庆大霉素8万U，1次/d，青霉素80万U，1次/d，注射2 d。
血脂测定：血清总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白胆固醇测定在日立7170A全自动生物化学分析仪上进行。
血管造影评价方法:兔麻醉、固定、备皮(右侧)同前。钝性分离右股动脉，直视下以21 g穿刺针行股动脉穿刺术。穿刺成功后，借助于导丝，置入5F动脉鞘，拔出导丝及扩张器。在X射线透视下经右股动脉注射优维显370约3～10 ml行腹主动脉造影。测定邻近参照血管内径，狭窄段管腔最小内径，狭窄长度，狭窄程度[管腔狭窄程度=(邻近参照血管内径狭窄段管腔最小内径)/邻近参照血管内径×100%)](目测+电子计算机自动测定，以目测为判断标准) ......
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