当归水提取物对小鼠放射损伤的防护作用
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作者单位：130012 吉林省肿瘤医院放疗科 当归是一种伞形科当归属多年生草本植物，其干燥的贮藏根是我国传统中药，具有悠久的药用历史，历代本草均有记载。中医的传统理论认为，当归的不同药用部位具有不同的功效。当归水提取物含有各种水溶性化学成分，近期研究发现，当归多糖除具有清除自由基、提高免疫力和抗肿瘤功能外[1]，还具有抗辐射损伤功能，对亚急性小鼠辐射损伤有良好的防护作用[2]。
DNA是多种诱变因子危害的主要目标，许多诱变因子都可以引起DNA的损伤，导致基因突变和染色体畸变。DNA是否受到损伤取决于抗诱变物对诱变因子的拮抗作用。染色体畸变分析作为一种简便、快速的细胞遗传学方法，正广泛应用于评价环境诱变剂以及放射损伤等因素对生物的危害程度。本文通过分析小鼠实验过程中的染色体畸变率，深入探讨当归水提取物对放射损伤的防护效应。
1 材料与方法
1.1 实验动物 由吉林大学白求恩医学院实动物中心提供的近交系昆明种小白鼠，体质量18～20 g，雌雄各半，实验动物合格证号：SCXK(吉)20070003。
1.2 试剂 当归水提取物：中药当归采购自吉林大药房并经鉴定。电动粉碎机粉碎后，称取当归粉末6 g，300 ml去离子水浸泡1 h，煎煮 3 次，初次30 min，后两次各20 min，煎煮过程中根据情况添加适量去离子水，收集三次滤液，浓缩至 20 ml，每毫升含当归相当于生药量300 mg，4℃暂时保存，实验前以无菌生理盐水稀释至所需浓度。
1.3 分组及实验方法 实验动物随机分为正常对照组(生理盐水)；照射对照组；当归抗照射实验组(当归各剂量+X射线全身照射)，每组6只动物，雌性雄性各半。当归共分为三个剂量，分别为1.5 g/kg 、3.0 g/kg、6.0 g/kg。生理盐水、当归均灌胃给药, 每10 g 体重 0.2 ml，连续灌胃6 d。
除正常对照组外，照射对照组及当归各剂量组于第六天灌胃后，均接受一次性X 射线全身照射，采用 SiemeneX 射线治疗机，将小鼠放入 30 cm×30 cm×20 cm 纸盒内，小鼠在盒内呈分散状态，照射源距小鼠100 cm，射野为30 cm×30 cm，剂量率为 1.5 Gy/min，总照射量为6 Gy。照射22 h后注入秋水仙素(4㎎/kg体质量)，照射24 h后，颈椎脱臼杀死所有小白鼠，剥离股骨，用滤纸将肌肉剔除干净，剪掉骨端，以1 ml注射器吸取37℃0.075 mKcl溶液，反复冲出骨髓，充分吸打混匀后，37℃低渗20 min，甲醇：冰醋酸＝3：1固定20 min，计3次，空气干燥法制片，10%吉姆萨染色，选择分散好、形态好的中期分裂相检查染色体畸变情况，每组分析250个中期分裂相。统计不同类型的染色体畸变，计数后，计算染色体畸变率。
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