浅析难治性癫痫患者血清层粘连蛋白的表达
【摘要】 目的 探讨难治性癫痫患者血清层粘连蛋白的表达。方法 我院进行治疗的难治性癫痫患者病例和非难治性癫痫患者病例各35例，分别作为难治性组和非难治性组，同时回顾分析同期进行健康体检的健康志愿者30名，作为健康组。分别对3组患者进行血清层粘连蛋白含量测定。结果 难治性组患者的层粘连蛋白检测结果明显高于非难治性组和健康组患者(P<005)，具有统计学意义；非难治性组患者的层粘连蛋白检测结果明显高于健康组患者(P<005)，具有统计学意义。结论 在癫痫患者中层粘连蛋白的表达会出现明显增加的现象，并且在难治性癫痫患者的血清中层粘连蛋白的表达量的增加现象则会更加的明显，在今后的临床工作中应对其予以注意。
【关键词】 层粘连蛋白；难治性癫痫；非难治性；表达--------------------------------------------------------------------------------
作者单位：473000 河南省南阳市医学高等专科学校 目前在临床上关于癫痫的发生机制的研究结果证实，癫痫的发病同诸多因素均存在一定的关系,现阶段神经网络学说正在受到世界医学的广泛关注。曾有研究表明，层粘连蛋白存在对生长锥异常生长进行重要的促进的效果,同轴突异常生长之间存在十分密切的相关性,为苔藓纤维发芽过程当中比较重要的一个因素,曾有学者经研究证实癫痫患者海马发生了层粘连蛋白的高表达现象[1]。在本次研究中出于对难治性癫痫患者血清层粘连蛋白的表达进行简要的分析与探讨，从而为今后的临床诊疗工作提供具有一定参考价值的理论依据的目的，笔者对我院收治的难治性癫痫患者、非难治性癫痫患者以及健康体检者进行了血清层粘连蛋白含量检测，并对检测结果进行比较分析。以下内容为本次研究的结果报告。
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1 资料与方法
11 一般资料 我院2009年6月至2011年6月在我院进行治疗的难治性癫痫患者病例和非难治性癫痫患者病例各35例，分别作为难治性组和非难治性组，回顾分析同期进行健康体检的健康志愿者30名，作为健康组。难治性组：男18例，女17例；年龄18~72岁，平均年龄(3636±1129)岁；非难治性组：男19例，女16例；年龄19~69岁，平均年龄为(3596±1198)岁；健康组：男17例，女13例，年龄21~67岁，平均年龄为(3486±1127)岁。3组患者的年龄、性别等一般资料比较无明显差异，具有可比性(P>005)。
12 诊断标准 ①在经过单一使用两种以上的一线抗癫痫药物后患者的癫痫得不到控制的患者。②抗癫痫药物用量均已达到最大耐受剂量后癫痫仍然得不到控制的患者。③经过合理用药治疗无效的患者。同时满足上述三个条件的患者诊断为难治性癫痫。
13 方法 分别对3组患者进行血清层粘连蛋白含量测定试验，使用EDTA2K抗凝管抽取患者晨起89时的静脉血，1300 g离心10 min分离血清待检。采用ELISA技术进行血清层粘连蛋白含量测定，步骤为：将按照一定比例对稀释的标准品分别加入到一排7孔中,加入的顺序一次为加入1∶ 2血清稀释样品、1∶ 100的生物素抗人层粘连蛋白抗体稀释工作液以及ABC工作液,在 37℃饿条件下分别对其进行温育1 h和30 min的时间；而后进行TMB显色处理,在波长为450nm处对吸光度值进行测定。
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14 统计学方法 采用SPSS170软件进行数据的统计与分析，数据资料用t检验， 组间对比用χ2检验，P<005为差异有显著性，具有统计学意义。
2 结果
难治性组患者的层粘连蛋白检测结果为(177421±30598)ng/L；非难治性组患者的层粘连蛋白检测结果为(121899±35197)ng/L；健康组的检测结果为(67512±7203)ng/L。难治性组患者的层粘连蛋白检测结果明显高于非难治性组和健康组患者(P<005)；非难治性组患者的层粘连蛋白检测结果明显高于健康组患者(P<005，见表1)。
3 讨论
作为一种比较常见的慢性脑部疾病, 癫痫患者的脑组织中存在许多异常的变化，会在癫痫的产生以及反复发作的过程中产生十分重要的影响。相关的临床研究已经证实,反复痫性发作或者是癫痫持续状态会引起患者的脑组织特别是海马结构等区域出现严重的损伤。长期癫痫发作会导致齿状回苔藓纤维侧枝发生出芽导致新的突触联系的产生,然而该异常的突触会导致一个正反馈系统的形成,增高齿状回颗粒细胞的兴奋性,产生一个“兴奋性环路”,进而引起慢性自发性癫痫的产生。微环境为对神经轴突能否再生产生影响的一个重要因素,相关研究表明细胞外基质能够对神经元 基质之间的黏附产生介导作用,对轴突生长进行引导与促进。层粘连蛋白为细胞外基质的一种主要的功能成分,研究表明自层粘连蛋白的α链羧基末端序列所衍生的通过19个氨基酸残基所组成的一个多肽片段，能够产生对中枢神经系统神经元轴突生长进行促进的效果[2]。
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在本次研究中我们发现，非难治性癫痫组层粘连蛋白含量明显比健康组高,又显著比难治性癫痫组低,导致这一现象的主要原因为，因采用药物对病情予以良好控制后,癫痫所引起的苔藓纤维发芽还没有产生充分的“兴奋性环路”,因此会导致突触重组过程发生停止,致使层粘连蛋白的表达低于难治性癫痫组,这也就说明层粘连蛋白在癫痫的难治性演变过程中具有重要的作用[3]。
综上所述，层粘连蛋白在癫痫患者中会出现表达增加的现象，而在难治性癫痫患者中血清中层粘连蛋白的表达量的增加现象则会更加的明显，因此，在今后的临床工作中应对该现象予以注意。
参 考 文 献
[1] 吴原MCP1在难治性癫痫患者脑组织中的表达.中国神经精神疾病杂志,2009,32(16):532533.
[2] 彭瑞强耐药性癫痫患者伴有痫样放电的脑组织中SCN8A基因产物的异常表达.中国神经精神疾病杂志,2009,33(10):585586.
[3] 林元相癫痫灶的超微结构观察及与癫痫发生机制的关系探讨.中华神经医学杂志,2009,23(14):272273., 百拇医药(尹永英 申冬冬)
【关键词】 层粘连蛋白；难治性癫痫；非难治性；表达--------------------------------------------------------------------------------
作者单位：473000 河南省南阳市医学高等专科学校 目前在临床上关于癫痫的发生机制的研究结果证实，癫痫的发病同诸多因素均存在一定的关系,现阶段神经网络学说正在受到世界医学的广泛关注。曾有研究表明，层粘连蛋白存在对生长锥异常生长进行重要的促进的效果,同轴突异常生长之间存在十分密切的相关性,为苔藓纤维发芽过程当中比较重要的一个因素,曾有学者经研究证实癫痫患者海马发生了层粘连蛋白的高表达现象[1]。在本次研究中出于对难治性癫痫患者血清层粘连蛋白的表达进行简要的分析与探讨，从而为今后的临床诊疗工作提供具有一定参考价值的理论依据的目的，笔者对我院收治的难治性癫痫患者、非难治性癫痫患者以及健康体检者进行了血清层粘连蛋白含量检测，并对检测结果进行比较分析。以下内容为本次研究的结果报告。
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1 资料与方法
11 一般资料 我院2009年6月至2011年6月在我院进行治疗的难治性癫痫患者病例和非难治性癫痫患者病例各35例，分别作为难治性组和非难治性组，回顾分析同期进行健康体检的健康志愿者30名，作为健康组。难治性组：男18例，女17例；年龄18~72岁，平均年龄(3636±1129)岁；非难治性组：男19例，女16例；年龄19~69岁，平均年龄为(3596±1198)岁；健康组：男17例，女13例，年龄21~67岁，平均年龄为(3486±1127)岁。3组患者的年龄、性别等一般资料比较无明显差异，具有可比性(P>005)。
12 诊断标准 ①在经过单一使用两种以上的一线抗癫痫药物后患者的癫痫得不到控制的患者。②抗癫痫药物用量均已达到最大耐受剂量后癫痫仍然得不到控制的患者。③经过合理用药治疗无效的患者。同时满足上述三个条件的患者诊断为难治性癫痫。
13 方法 分别对3组患者进行血清层粘连蛋白含量测定试验，使用EDTA2K抗凝管抽取患者晨起89时的静脉血，1300 g离心10 min分离血清待检。采用ELISA技术进行血清层粘连蛋白含量测定，步骤为：将按照一定比例对稀释的标准品分别加入到一排7孔中,加入的顺序一次为加入1∶ 2血清稀释样品、1∶ 100的生物素抗人层粘连蛋白抗体稀释工作液以及ABC工作液,在 37℃饿条件下分别对其进行温育1 h和30 min的时间；而后进行TMB显色处理,在波长为450nm处对吸光度值进行测定。
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14 统计学方法 采用SPSS170软件进行数据的统计与分析，数据资料用t检验， 组间对比用χ2检验，P<005为差异有显著性，具有统计学意义。
2 结果
难治性组患者的层粘连蛋白检测结果为(177421±30598)ng/L；非难治性组患者的层粘连蛋白检测结果为(121899±35197)ng/L；健康组的检测结果为(67512±7203)ng/L。难治性组患者的层粘连蛋白检测结果明显高于非难治性组和健康组患者(P<005)；非难治性组患者的层粘连蛋白检测结果明显高于健康组患者(P<005，见表1)。
3 讨论
作为一种比较常见的慢性脑部疾病, 癫痫患者的脑组织中存在许多异常的变化，会在癫痫的产生以及反复发作的过程中产生十分重要的影响。相关的临床研究已经证实,反复痫性发作或者是癫痫持续状态会引起患者的脑组织特别是海马结构等区域出现严重的损伤。长期癫痫发作会导致齿状回苔藓纤维侧枝发生出芽导致新的突触联系的产生,然而该异常的突触会导致一个正反馈系统的形成,增高齿状回颗粒细胞的兴奋性,产生一个“兴奋性环路”,进而引起慢性自发性癫痫的产生。微环境为对神经轴突能否再生产生影响的一个重要因素,相关研究表明细胞外基质能够对神经元 基质之间的黏附产生介导作用,对轴突生长进行引导与促进。层粘连蛋白为细胞外基质的一种主要的功能成分,研究表明自层粘连蛋白的α链羧基末端序列所衍生的通过19个氨基酸残基所组成的一个多肽片段，能够产生对中枢神经系统神经元轴突生长进行促进的效果[2]。
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在本次研究中我们发现，非难治性癫痫组层粘连蛋白含量明显比健康组高,又显著比难治性癫痫组低,导致这一现象的主要原因为，因采用药物对病情予以良好控制后,癫痫所引起的苔藓纤维发芽还没有产生充分的“兴奋性环路”,因此会导致突触重组过程发生停止,致使层粘连蛋白的表达低于难治性癫痫组,这也就说明层粘连蛋白在癫痫的难治性演变过程中具有重要的作用[3]。
综上所述，层粘连蛋白在癫痫患者中会出现表达增加的现象，而在难治性癫痫患者中血清中层粘连蛋白的表达量的增加现象则会更加的明显，因此，在今后的临床工作中应对该现象予以注意。
参 考 文 献
[1] 吴原MCP1在难治性癫痫患者脑组织中的表达.中国神经精神疾病杂志,2009,32(16):532533.
[2] 彭瑞强耐药性癫痫患者伴有痫样放电的脑组织中SCN8A基因产物的异常表达.中国神经精神疾病杂志,2009,33(10):585586.
[3] 林元相癫痫灶的超微结构观察及与癫痫发生机制的关系探讨.中华神经医学杂志,2009,23(14):272273., 百拇医药(尹永英 申冬冬)