锌离子缺乏对模型小鼠NPP行为学改变的实验研究
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神经病理性疼痛 (Neuropathic Pain, NPP) 是由神经系统损伤引起的一种慢性疼痛疾病，主要表现为痛觉过敏、触诱发痛 (或称痛觉超敏)、局部感觉缺失以及自发性疼痛等[1]。本研究利用坐骨神经分支选择损伤模型 (spared nerve injury, SNI) 观察饮食锌缺乏处理对SNI模型动物行为学变化以及对脊髓中锌离子的影响，从而为探讨脊髓中的锌代谢以及锌在NPP产生与传导中的作用和机制研究提供重要的实验依据。
1 资料与方法
1.1 选取48只SPF级健康CD-1小鼠。随机分为4组：① SHAM：正常喂养2w后接受假手术。② N-SNI：正常喂养2w后接受SNI手术。③ L-SNI：低锌喂养2w后接受SNI手术。④ H-SNI：高锌喂养2w后接受SNI手术。其中，低锌喂养组给予进食低锌饲料 (锌：0.85 mg/kg，AIN-76A， Research Diets)；高锌喂养组给予饮用硫酸锌水溶液(227 mg/L)；其他动物给予适锌饲料 (锌：30.0 mg/kg)。
1.2 SNI模型
动物麻醉及无菌处理同假手术组。暴露坐骨神经主干至坐骨神经分叉，将其三大主要分支中的腓肠神经保留，结扎并切断腓总神经和胫神经。结扎神经后仔细止血，生理盐水清洗后逐层缝合。
1.3 机械性痛阈值检测及原子吸收光谱检测
将小鼠单独放置于透明的有机玻璃圆柱体中，其下为金属丝网眼。待小鼠适应环境后，以von Frey刺激小鼠术侧足底，从轻至重，每种型号刺激针刺激10次，每次间隔5 s。鼠会出现抬足、缩足、快速甩足以及甩足后舔足等反应。当VonFrey纤毛针曲成90度时小鼠仍不抬足，视为无反应。以出现5次以上缩足反应为阳性，记录能够引发缩足反应的最小力度为机械性痛阈阈值(g)。于术前2 d测定后足基础机械性痛阈，并分别于术后第1、3、5、7、9、11、13 d测痛阈。
1.4 统计学分析 计量资料以均数±标准差(x±s)表示，应用SPSS 13.0软件分析数据，组间比较采用方差分析，组内比较采用配对t检验；P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 机械性痛阈值检测结果
与基础值比：假手术组术后痛阈无明显下降；模型组及低锌模型组术后痛阈均显著降低，差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比，锌缺乏组痛域降低，并有统计学意义(P<0.05)(表1)。
2.2 原子吸收光谱检测结果
通过原子吸收光谱法我们进一步检测了脊髓后角总锌量含量的变化。结果表明，与假手术组相比，模型组小鼠脊髓后角总锌含量无明显变化，而锌缺乏小鼠总含量明显减少，详见表2。
3 讨论
有研究发现，脊神经背根切断术后，小鼠痛阈明显降低，脊髓后角浅层灰质尤其是脊髓Ⅰ-Ⅳ区的锌离子明显减少，推断锌可能参与了痛觉的传导[2]。本研究发现，脊髓背侧角浅层分布着大量的锌离子；动物经SNI手术后，其术侧脊髓背侧角浅层锌离子显著减少，而其机械性痛阈值也随之显著下降；本研究结果证实，与模型组相比，锌缺乏小鼠脊髓后角中的锌离子减少更为显著，其机械性痛阈值降低也更为显著。我们推测之所以出现这种结果可能是由于坐骨神经损伤时，由于感觉神经元的周围突受损，导致其向脊髓背侧角运输的锌离子减少，增高了甲基.D.天门冬氨酸受体 (N-methyl-D-aspartate receptor, NMDA) 受体的兴奋性并降低了β-氨基丁酸对疼痛传递的抑制作用 ......
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