HC2-HPV-DNA检测联合液基细胞学在宫颈癌及癌前病变中的应用
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【摘要】 目的 探讨HC2HPVDNA检测联合液基细胞学在宫颈癌及癌前病变诊断中的预测价值。方法 对9424例门诊受检者行液基细胞检测，细胞学结果异常的851例患者再应用杂交捕获法HC2HPVDNA作13种高危型HPV检测。结果 9424例受检者中，共发现细胞学异常者851例，占903%，其中Ascus522例、LISL208例、HISL96例、SCC25例，分别占553%、220%、101%、026%。851例细胞学异常的受检者中高危型HPV阳性539例，阳性率6334%；其中Ascus、LISL、HISL高危型HPV阳性率分别为5364%、7019%、9271%，说明癌前病变与高危型HPV感染密切相关。结论 利用HC2HPVDNA检测联合液基细胞学(TCT)有针对性进行阴道镜下组织病理检查，指导临床，是诊断宫颈癌及癌前病变的重要手段。
【关键词】 人乳头瘤病毒;液基细胞学;宫颈癌前改变
宫颈癌是妇女最常见的恶性肿瘤之一，发病率在世界范围内居女性恶性肿瘤的第二位。近年来，我国宫颈癌的发生有明显上升和年轻化的趋势。研究发现，人乳头瘤病毒的持续感染时癌前病变及宫颈癌发病的主要致病因子，宫颈鳞状上皮从感染高危型HPV病毒并形成持续感染状态，逐渐细胞发生恶性改变，导致最终发展为宫颈癌是一个漫长的过程，平均需要8~10年。因此，早期发现，早期诊断及治疗癌前病变有着重要的意义。2010年8月至2012年7月，我科对9424例门诊患者进行了液基细胞学及HC2HPVDNA检测，取得了较满意的结果，先报告如下。
1 资料与方法
11 一般资料 2010年8月至2012年7月在我院门诊就诊的9424例患者，年龄19~65岁，平均年龄38岁，临床症状包括阴道瘙痒、白带异常或异味、接触出血、阴道不规则流血或无任何自觉症状。对在我院行液基细胞学检测结果异常的患者行HC2HPVDNA检测。
12 方法
121 液基细胞学标本采集及处理 用无菌专用细胞刷插入宫颈管内旋转5周收集宫颈外口和宫颈管的脱落细胞标本，然后将宫颈刷放入专用的细胞标本保存液中充分漂洗，采用爱尔兰Cellslide液基薄层制片仪完成制片，巴氏染色后采用2001年国际癌症协会推荐的TBS分级诊断标准阅片。病例分为以下几类：正常细胞(NILM)、非典型鳞状上皮细胞(Ascus)、低度鳞状上皮内病变(LISL)、高度鳞状上皮内病变(HISL)、鳞状细胞癌(SCC)。细胞学异常包括Ascus及以上病变。
122 对TCT检查异常者进行第二代杂交捕获实验检测高危型人乳头瘤病毒(HC2)。用专用小刷至于宫颈口与黏膜交界处逆时针轻轻旋转3圈，停留10 s；将收集分泌物及小刷保存于专用试管中。采用美国Digene公司提供的试剂盒，通过基因捕获技术(HC2),步骤如下：宫颈分泌物标本加裂解液分解双链DNA病毒为单链核苷酸；DNA单链与RNA探针结合为RNADNA杂交体；杂交体与与偶联有碱性磷酸酶的第二抗体结合；碱性磷酸酶使酶底物发光，判读光的强弱可确定碱性磷酸酶的含量，通过仪器分析从而确定RNADNA的含量。
13 统计学方法 统计学方法采用χ2检验。
2 结果
21 液基细胞学检查结果 9424例TCT受检者，共发现异常851例，占903%，其中Ascus522例，LSIL208例，HISL96例，SCC25例，分别占553%、202%、101%、026%。
22 细胞学异常的标本中高危型HPV情况见表1。851例细胞学异常的标本中高危型HPV539例，阳性率6334%。不同类型标本高危型HPV感染结果显示：各组间的HPV阳性率有明显的差异(P<001)。
3 讨论
宫颈癌是威胁妇女健康和生命的主要疾病之一。但是，它却是可以预防、治愈的疾病。有调查，宫颈癌患者的5年生存率Ⅰ期为84%，Ⅱ期为28%，IIIIV期14%，而宫颈原位癌的5年存活率可达到100%[1]。宫颈液基细胞学(TCT)细胞学检查作为宫颈疾病三阶梯诊断的第一步，可以在早期发现宫颈病变。但TCT检测是在显微镜下观察宫颈脱落细胞的形态，由于主观和客观的因素，TCT检查不可避免的有一定的漏诊率和误诊率。
近年来研究表明，高危型HPV感染是宫颈癌发生的必要条件和主要危险因素[2]。流行病学资料显示，95%以上的宫颈癌患者体内都能检测到HPVDNA约80%的妇女一生中会感染HPV,但大多数为一过性，只有约5%~10%会发展为癌前改变甚至癌变。因此，选择适当的检测方法准确的分流其中的高危人群有着重要的指导意义。HC2HPVDNA检测方法是目前唯一经美国食品和药品管理局批准用于宫颈癌初筛的检测方法。能够检测出与宫颈癌密切相关的13种HPV类型。HC2HPVDNA检测是一种基因水平的检测，受外界因素及人员素质的干扰较小。我院9424例细胞学异常患者的高危型HPVDNA检测 ......
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