HLA—B27/B7抗原检测在诊断强直性脊柱炎中的临床价值
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【摘要】 目的 探讨HLA-B27/B7抗原检测在诊断强直性脊柱炎(AS)中的临床价值。方法 选取144例门诊及住院高度疑似AS的患者，应用流式细胞仪对其标本进行HLA-B27/B7抗原检测。结果 HLA-B27抗原阳性率在青少年人群比较高，且男性显著高于女性，受检的144例患者，HLA-B27抗原阳性率为63.9%，低于确诊为AS的阳性率(91.1%)。HLA-B27抗原检测对诊断AS的灵敏度为91.1%(82/90)，特异度为81.5%(44/54)，正确率为87.5%(126/144)。结论 HLA-B27抗原与AS密切相关，对临床诊断AS很有帮助，用流式细胞术进行检测是较好的方法。
【关键词】强直性脊柱炎；流式细胞术；HLA-B27
强直性脊柱炎(AS)是一种常见的慢性炎症性关节病，主要影响脊柱关节及骶髂关节，主要发病于年轻男性。该病诊断的直接证据是X线下脊柱的特征性改变及骶髂关节炎，但这种改变只有在疾病发展到一定的程度时才能被观察到。HLA抗原是人类主要组织相容性复合体(major histocompatibity complex，MHC)的表达产物，在免疫系统中主要负责细胞之间的相互识别和诱导免疫反应，调节免疫应答的功能。HLA-B27基因属于Ⅰ型MHC基因。人们在很早就发现了HLA-B27抗原的表达与AS有着高度的相关性[1，2]。在临床上，由于AS的症状与许多疾病相似而难以确诊，因此，HLA-B27的检测在AS的诊断中有着重要的意义。本文用流式细胞仪检测AS患者外周血淋巴细胞HLA-B27的表达，探讨其在临床诊断中的应用价值。
1 资料与方法
1.1 一般资料 本院2009年1月至2012年1月到骨科、风湿科住院的144个病例，其中男110例，女34例，平均年龄34.1岁，20以下38例，20～30岁29例，30～40岁26例，40岁以上51例。其中有90例患者是采用1984年纽约修订的AS诊断标准确诊为AS。
1.2 仪器与试剂 仪器采用美国贝克曼公司的BeckmanCoulte FC500流式细胞仪，单克隆抗体HLA-B27-FITC/ HLA-B7-PE、溶血素、鞘液均来自贝克曼公司的标准试剂盒。
1.3 方法 操作按SOP要求，取流式管2支，分别加入5 μl单克隆抗体(HLA-B27-FITC/ HLA-B7-PE)和同型对照(IgG2a-FITC/ IgG1-PE)，分别向两支管中加入50 μl混匀的抗凝全血，混匀后室温避光15～20 min，然后加入溶血素300 μl，混匀后室温避光10 min，加入500 μlPBS，1500r/min离心5 min，弃上清，加入500 μlPBS，混匀上机测样。
1.4 获取数据 采用流式细胞仪自带的软件获取数据并进行分析。如图1所示，先通过FS-SS双参数图圈定淋巴细胞设门，再分析淋巴细胞中HLA-B27+/HLA-B7-细胞群的荧光强度和百分比。
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