【摘要】 目的 克隆乙肝病毒PreS/S基因及构建真核表达质粒。方法 以HBSAg阳性患者DNA为模板PCR法扩增PreS/S基因， PCR产物测序分析正确后克隆至真核表达载体pcDNA3.1。结果 酶切鉴定和序列分析证实构建质粒含PreS/S基因。结论 PreS/S基因克隆及其真核表达质粒构建成功可用于肝癌发生发展的分子生物学研究。

    【关键词】 乙肝病毒；PreS/S基因；质粒

    乙肝病毒(hepatitis B virus， HBV)是肝细胞癌发生的主要病因已成定论， 而其作用的分子机制尚未阐明。具有转录调控作用的乙肝病毒PreS/S基因在病毒复制、炎症反应、肝细胞恶变等分子调控过程中发挥重要作用。针对PreS/S基因生物功能的研究已经成为揭示肝细胞癌变分子机制的热点， 构建PreS/S基因真核表达质粒将对进一步研究HBV在肝癌形成中的作用提供有力的工具和手段。

    1 实验材料

    1. 1 临床标本 取标本库内8例临床HBSAg阳性患者血液标本10 ml。

    1. 2 菌株、质粒、工具酶和试剂 pGEM-T vector system I扩增载体质粒系统；pCDNA3.1载体质粒；大肠杆菌感受态TG1；限制性核酸内切酶Kpn I和HinD III；DNA连接酶；TapDNA聚合酶；PCR产物纯化胶回收试剂盒：质粒抽提试剂盒；基因组DNA抽提试剂盒；RNA提取试剂盒等由广西肿瘤防治研究所综合实验室提供 ......
------
    连芳 黄超源 邬国斌 广西医科大学生理教研室;广西医科大学;广西医科大学附属肿瘤医院肝胆外科;

    【摘要】目的克隆乙肝病毒PreS/S基因及构建真核表达质粒。方法以HBSAg阳性患者DNA为模板PCR法扩增PreS/S基因,PCR产物测序分析正确后克隆至真核表达载体pcDNA3.1。结果酶切鉴定和序列分析证实构建质粒含PreS/S基因。结论 PreS/S基因克隆及其真核表达质粒构建成功可用于肝癌发生发展的分子生物学研究。

    【关键词】 乙肝病毒 PreS/S基因 质粒

    【基金】教育部博士点专项基金(项目编号:20104503120007) 广西教育厅科研项目(项目编号:201010LX058)

    【分类号】R512.62

    乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)是肝细胞癌发生的主要病因已成定论,而其作用的分子机制尚未阐明。具有转录调控作用的乙肝病毒PreS/S基因在病毒复制、炎症反应、肝细胞恶变等分子调控过程中发挥重要作用。针对PreS/S基因生物功能的研究已经成为揭示肝细胞癌变分子机制的热点