人表皮干细胞的分离培养
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2013年10月25日
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田亚宁 周智辉 梁漫 董昌虎 何春玲 仝航斌 李宏 陕西中医学院第二附属医院;
【摘要】目的探索人表皮干细胞原代培养方法。方法将皮肤标本进行分离,用DispaseⅡ酶消化表皮皮片后,重悬细胞,接种于铺有Ⅳ型胶原的培养瓶进行培养。表皮干细胞的鉴定采用免疫细胞化学技术检测其表面标记物β1整合素、CK19的表达。对表皮干细胞与角质形成细胞的克隆形成情况进行比较。结果倒置相差显微镜下观察细胞形态及生长状况良好,表皮干细胞β1整合素及CK19角蛋白染色阳性。表皮干细胞克隆形成率高于角质形成细胞(P0.05)。结论采用本方法进行人表皮干细胞的培养较为理想。
【关键词】 表皮干细胞 培养 鉴定
【基金】陕西省教育厅专项科研计划项目(项目编号:2010JK515)
【分类号】R329
表皮干细胞具有无限增殖的能力,在组织工程皮肤的研究中具有重要的作用,本文就表皮干细胞的原代培养进行探讨。1材料与方法1.1主要试剂DMEM培养基(dulbecco'smodifiedeaglemedium,DMEM),单克隆抗体β1整合素,单克隆抗体CK19,Ⅳ型胶原,DispaseⅡ酶,胎牛血清(FBS),表皮细胞生长
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