体外培养人脐带血间充质干细胞向胰岛细胞 分化及对糖尿病治疗的实验研究(2)
1. 3. 3统计学方法采用SPSS11.5软件处理数据, 计量资料以均数±标准差( x-±s)来表示, 进行t检验, P<0.05表示差异具有统计学意义。1. 4胰岛样细胞移植造模糖尿病大鼠
1. 4. 1大鼠糖尿病模型的制备[8]将12只SD大鼠随机分为实验组8只和对照组4只。实验组大鼠空腹12 h后, 经腹腔注射70 mg/kg链脲佐菌素(以0.1 mol/L枸橼酸缓冲液溶解), 对照组腹腔注射等体积的生理盐水。两组大鼠注射后2 d, 4 d, 6 d从尾静脉采血检测空腹血糖, 选连续3次血糖浓度高于16.7 mmol/L(正常值为2.80~7.56 mmol/L)的大鼠作为糖尿病模型。
1. 4. 2胰岛样细胞团的移植8只实验组分为4只胰岛样细胞组, 4只模型对照组。取2×106个的第4~8代HUCB-MSCs用900 μl PBS重悬细胞, 吸入1 ml注射器内经尾静脉注入糖尿病鼠体内。模型对照组注入等体积的生理盐水。各组大鼠均于移植前及移植后2 d检测空腹血糖浓度, 以后每周定点检测空腹血糖1次。
2结果
2. 1贴壁细胞鉴定对第4代贴壁细胞通过免疫细胞化学染色, 结果显示贴壁的细胞CD49d表达阳性, 细胞质呈棕黄色(见图1);而CD34表达阴性, 大部分细胞质未着色, 细胞核为蓝色(见图2) ......
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