1. 3 方法

    1. 3. 1 样品的制备 各管分别加入CD3FITC/CD4PE/CD45 PerCP、CD3FITC/CD8PE/CD45PerCP荧光抗体20 μl， 再分别加入新鲜EDTA-K3抗凝外周血100 μl， 混匀， 室温避光孵育 20 min， 加入 1∶9 配制的溶血素 2 ml， 避光 10 min。2000 r/min 离心5 min， 倒掉上清液， 加入 PBS 缓冲液 2 ml， 2000 r/min 离心5 min。去上清， 加入500 μl PBS混匀待测。

    1. 3. 2 流式细胞仪测定 以荧光微球calibrite 3-colour校准仪器补偿、使仪器分辨率CV<2%达到最佳工作状态， 采用MultiSET 软件获取数据。建立SSC/CD45Percp、CD4PE/CD3 FITC、SSC/CD3FITC荧光点图， 用CD45-PerCP/SSC-Gating和Back-Gating 细胞群双圈门以排除碎片的干扰 ......