CK19、TPO、Galectin—3与HBME—1蛋白表达对甲状腺肿瘤 病理诊断作用分析(2)
1. 2 方法 手术病理组织标本以10%的中性福尔马林固定, 并常规石蜡包埋及3 μm厚连续病理切片, 并进行HE染色。以Power Vision二步法进行DAB染色以及苏木精复染, 测定CK19、TPO、Galectin-3与HBME-1表达情况, 以已知阳性切片作为阳性对照。常规预处理以后, 阻断内源性过氧化物酶, 采用PBS进行3次冲洗, 滴加一抗, 在37℃下孵育1~2 h, 再以PBS冲洗3次, 然后滴加羊抗鼠多聚体, 置于室温下孵育30 min, 再次采用PBS冲洗3次。最后采用DAB进行显色, 并冲洗后以中性树胶封片。CK19、TPO、Galectin-3与HBME-1单克隆抗体与辣根酶标记羊抗小鼠多聚体均选自福建省福州迈新公司。1. 3 结果判定 由2名高年资病理医师进行双盲阅片。表达均定位于细胞质内, 以细胞质中出现棕黄色颗粒并且具有明显高于背景着色的判定为阳性, 其中, HBME-1可存在明显细胞膜着色, Galectin-3可存在部分细胞核着色。切片均选择5个高倍镜视野(400×)计数, 统计每个视野中阳性细胞所占百分数平均值, 以此作为阳性细胞数。
1. 4 统计学方法 采用统计学软件SPSS18.0对数据进行统计分析。计数资料以率(%)表示, 采用χ2检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。
2 结果
2. 1 四项标志物在甲状腺病变组织中的表达 CK19、Galectin-3及HBME-1在甲状腺肿瘤良、恶性间的阳性表达率比较 ......
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