洋金花提取物对单胺氧化酶B的抑制作用研究(2)
1. 2 实验材料 曼陀罗采于邢台学院校园北门, 由邢台学院化学工程与生物技术学院唐伟斌教授鉴定。健康Wistar大鼠, 购于河北省实验动物中心, 许可证号:SCXK(冀)2003-1-003。1. 3 方法
1. 3. 1 植物提取物的制备 将植物材料阴干, 粉碎后过
80目筛。用索氏提取法以95%的乙醇、90℃回流提取8 h。滤液减压蒸发, 加入少量蒸馏水, 超声震荡。静置过夜后将滤液离心, 弃沉淀取上清。将上清液水浴蒸干, 105℃烘干至恒重。置干燥器中冷却30 min, 迅速精密称定重量[15]。测定得率。
1. 3. 2 MAO的制备与酶活测定 以Wistar大鼠肝组织为材料提取MAO, 提取方法参考文献[16]。酶活测定参照文献[17]。以MAO-B的特异性底物苄胺制备反应体系, 其产物苯甲醛在250 nm处有最大光吸收, 利用分光光度法对MAO-B酶活进行检测。反应体系为磷酸钾缓冲液(0.2 M ......
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