东莞地区老年人高脂血症ApoE基因多态性与血脂水平相关性探讨(2)
1. 2 方法 所有研究对象均在抽血前未口服降血脂药物, 空腹12~14 h, 抽取静脉血3~4 ml送检, 分别检测TC、HDL-C、LDL-C、TG。基因组DNA提取标本采用空腹ETDA抗凝全血, -20℃保存。利用AU5800全自动生化分析仪检测TG、TC、LDL-C、HDL-C, 试剂采用宁波美康生物科技有限公司。DNA提取采用深圳汇研全自动核酸提取仪进行, 采用配套试剂进行。引物合成由上海天根生物公司合成。分析TG、TC、LDL-C、HDL-C与ApoE基因多态性的相关性。
1. 3 ApoE基因型扩增及电泳 95℃预变性10 min, 95℃变性5 min, 62℃退火50 s, 72℃延伸1 min, 30个循环, 72℃再延伸7 min。PCR产物进行HhaI内切酶酶解, 取酶解产物10 ml行8%聚丙烯酰胺凝胶电泳, 溴化乙锭染色, 在紫外灯下观察结果。
1. 4 统计学方法 采用SPSS18.0统计学软件对研究数据进行统计分析。计量资料以均数±标准差( x-±s)表示 ......
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