miR-1与miR-499调控心肌细胞增殖与凋亡机制研究(2)
1. 4 RT-PCR检测转染情况 采用miRNeasy Serum/plasma Kit试剂盒提取血清RNA， 并检测RNA的纯度。采用逆转录试剂盒将miRNA逆转录为特定的cDNA， 并置于-80℃冰箱保存备用。RT-PCR反应：应用制备好的cDNA作为模版， 分别配置空白对照组、阴性对照组、miR-1 inhibitor组、miR-499 mimics组反应管， 以U6作内参。采用ABI 7500软件分析熔解曲线， 用2-△Ct计算miRNA基因相对表达量。1. 5 实验分组及H2O2处理 设置空白对照组、H2O2组(未进行转染的H9C2心肌细胞)、干预组A(miR-1 inhibitor转染的H9C2心肌细胞)、干预组B(miR-499 mimics转染的H9C2心肌细胞)、干预组C(miR-1 inhibitor+miR-499 mimics转染的H9C2心肌细胞)。除空白对照组外， 其余四组H9C2心肌细胞均采用200 μmol/L的H2O2处理6 h ......
您现在查看是摘要页，全文长 3991 字符。