孝飞飞 孙洪光 李建厂 朱淑霞 田春梅

    多药耐药是化疗失败的最主要原因之一。凋亡抑制蛋白和多药耐药膜转运蛋白P-gp 过度表达是多药耐药的两个主要原因[1],Apollon 是凋亡抑制蛋白家族主要成员,尤其在复发白血病、诱导无缓解、髓外白血病患者中高表达[2]。本实验通过siRNA 技术沉默562/DNR 细胞中Apollon 基因表达,观察P-gp 表达水平,检测K562/DNR 对化疗药物敏感性的变化。现报告如下。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂 将细胞分为实验组(脂质体转染靶向Apollon 的siRNA K562/DNR)、细胞对照组(K562/DNR)和阴性对照组(脂质体转染的siRNAnc)。K562/DNR 细胞株由滨州医学院中心实验室培养；脂质体LipofectamineTM2000 购于美国Invitrogen 公司；兔抗人Apollon 多克隆抗体一抗购于美国Santa Cruz 公司,带有红色荧光标记的四甲基异硫氰酸罗丹明(TRITC)二抗购于上海江莱生物科技有限公司；四甲基偶氮唑盐购于美国Sigma 公司；Apollon 及β-actin 引物由上海赛百盛公司合成；靶向Apollon 的siRNA 序列、阴性对照siRNA 序列由上海吉玛公司合成 ......